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A lactose e o acucar presente no leite e seus derivados. A responsavel por hidrolisar este substrato e a enzima β-galactosidase, formando glicose e galactose. Atraves dessa enzima sao produzidos diversos produtos como, iogurtes e leites 0% lactose, galactoligossacarideos e xarope de glicose-galactose. A obtencao experimental dos parâmetros cineticos da β-galactosidase auxilia na otimizacao do seu uso na industria. Com isto, o objetivo deste trabalho e determinar os parâmetros cineticos da enzima β-galactosidase de Kluyveromyces lactis, em funcao do pH e da temperatura. Os testes foram realizados em pH 5,8, 6,2 e 6,6 nas temperaturas de 30, 32, 34, 36, 38 e 40°C em concentracoes de lactose de 0,02 a 0,1g/L e volume de enzima 10µL, sendo os dois ultimos permanecendo constantes. Os resultados indicam que a maior atividade foi conseguida em pH 6,2, temperaturas de 32, 34 e 36°C e concentracao de substrato 0,1g/L, nestas condicoes a enzima hidrolisou 95% da lactose. Foi ajustado o modelo de Michaelis-Menten e obteve-se os valores da constante de Michaelis, Km, e velocidade maxima, V max . Com estes ajustes foram obtidos, V max e Km, em pH 6,2 e temperaturas de 32, 34 e 36°C que sao 0,0750g/L.h, 0,0822g/L.h e 0,0786g/L.h e 0,0177g/L, 0,0165g/L e 0,0160g/L, respectivamente, com R 2 de 0,920 e 0,940. Os resultados permitem concluir que a temperatura e o pH interferem na atividade da enzima. As temperaturas de 32 a 36°C em pH 6,2, as condicoes onde ha maior efetividade da enzima, com maiores valores de V max e menores valores de Km. |
