| Popis: |
Kalsiyum bagimli hucre adezyon molekullerinden kadherin ust ailesinin bir uyesi olan E-kadherin’in erken embriyonik gelisim sirasinda hucre adezyonunda kritik rolleri vardir. E-kadherin ekspresyonunu ve dagilimini belirlemek icin, gec 8 hucre, morula ve blastosist asamalarinda bulunan embriyolara immunofloresan boyama uygulandi. Ilk olarak disi farelere superovulasyon uyguladiktan sonra sakrifiye edilerek oviduktar izole edildi. CD1 disi farelerin oviduktlari FHM HEPES-tamponlu medyum ile yikanarak 2 hucreli embriyo elde edildi ve istenilen embriyo asamalarinda kullanilmak uzere KSOM medyumu icerisinde blastosist asamasina kadar kulture edildi. Embriyolar tespit edildi ve E-kadherin ile immun boyama yapildiktan sonra, floresan mikroskobu kullanilarak goruntuler cekildi ve degerlendirildi. E-kadherinin gec 8 hucreli asamadan tamamen genisletilmis blastosist asamalari boyunca eksprese edildigi gosterildi. Gec 8 hucreli embriyoda E-kadherin, membranin apikal bolgelerinde yer almazken sadece hucre-hucre temas bolgelerinde var oldugu gozlemlendi. Morulada E-kadherin, blastomerlerin yuzeyinde ve hucre-hucre birlesim alanlarinda lokalize oldugu goruldu. Blastosist asamasindaki embriyolarda, ICM'nin yuzeyinde lokalize olurken, TE hucrelerinde hucre-hucre temas bolgelerinde membran boyamasi oldugu da gosterilmistir. Sonuclarimiz, E-cadherin kaynakli hucre adezyonunun, kompaksiyon, trofektoderm epitelyal farklilasmasi ve implantasyon surecinde onemli rollere sahip oldugunu gostermektedir. |
