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Die Altersforschung untersucht die Ursachen und Mechanismen des Alterns. Verl��ren Stammzellen nicht die F��higkeit, sich zu erneuern, w��rde die Anf��lligkeit gegen��ber Krankheiten im Alter nicht zunehmen und die derzeitige durchschnittliche Lebensdauer der Menschen k��nnte deutlich ��berschritten werden. Das Ziel der vorliegenden Arbeit ist es, die Zellproliferation und Seneszenz in mesenchymalen Stammzellen aus Fettgewebe (adiposederived stem cells, ASCs) unter besonderer Ber��cksichtigung der Rolle von oxidativem Stress sowie von Radikalf��ngern zu untersuchen. ASCs haben im Unterschied zu anderen Stammzellen den Vorteil, dass sie leicht verf��gbar sind und ��ber ein gro��es Proliferations- und Differenzierungspotenzial verf��gen. Zun��chst wurden ASCs von Fettgewebe isoliert. Eine erfolgreiche Zellpr��paration gem���� der Minimalkriterien der Internationalen Gesellschaft f��r Zelltherapie (International Society for Cellular Therapy, ISCT) wurde anhand der positiven Stammzellmarker (CD29, CD44, CD73, CD90, CD105, CD166) und der negativen Stammzellmarker (CD31, CD34, CD133) in Passage 3 (P3) festgestellt. Verglichen wurden ASCs in niedriger Passage (P6, ex vivo*) und in hoher Passage (P16, in vitro) sowie Zellen von jungen (ASCj, j��nger als 35 Jahre) und alten Spendern (ASCa, ��lter als 55 Jahre). Weitere Einflussgr����en waren erh��hter oxidativer Stress durch die Inkubation der Zellen mit Wasserstoffperoxid sowie der Schutz vor oxidativem Stress durch die Inkubation mit den Radikalf��ngern NMPG und Trolox. Messgr����en waren die Stammzellmarker, wobei drei positive mesenchymale Stammzellmarker (CD73, CD90 und CD105) sowie ein negativer h��matopoetischer Stammzellmarker (CD34) verwendet wurden. Weitere Messgr����en waren der Gehalt an freien Sauerstoffradikalen (reactive oxygen species, ROS), die Letalit��t der Zellen, die Proliferationsmarker Ki67, p27 und p21 sowie die Seneszenzmarker SA-��-Galaktosidase-Aktivit��t, Sirt1 und FoxO3a. |
