Quantification de dépôts de protéines amyloïdes par microscopie de fluorescence à feuillet de lumière

Autor: Jean-Baptiste Gibier, Raphaelle Caillerez, Antonino Bongiovani, Per Hammarström, Romain Perbet, Luc Buée
Rok vydání: 2021
Předmět:
Zdroj: Morphologie. 105:S23-S24
ISSN: 1286-0115
DOI: 10.1016/j.morpho.2021.05.046
Popis: La maladie d’Alzheimer est caracterisee du point de vue neuropathologique par des depots de proteine tau et de proteine beta-amyloide. Les modeles murins transgeniques de la maladie expriment l’une ou l’autre des proteines humaines mutee induisant leur depot. Ces modeles initialement developpes pour l’etude mecanistique de la maladie permettent egalement d’evaluer les therapeutiques potentielles. L’evaluation de l’efficacite d’un traitement se fait par etude comportementale et de l’abondance des depots. Cette derniere necessite une analyse immunohistochimique de l’ensemble du cerveau sur coupes etagees puis quantification du signal. Afin de simplifier cette etape d’analyse nous avons developpe une technique d’evaluation de la charge en depots sur ceveau entier. Le tissu est d’abord transparise par dissolution des lipides par la methode 3DISCO puis traite par le compose chimique fluorescent hx-FTAA se fixant specifiquement sur les depots proteiques amyloides (proteines agregees en feuillets beta-plisses de tau et beta-amyloide). L’acquisition des images se fait par microscopie de fluorescence a feuillet de lumiere (systeme LaVision BioTec) et la quantification du signal sur le logiciel Imaris®. Nous montrons dans cette etude pilote la faisabilite de la technique sur deux modeles murins transgeniques de maladie d’Alzheimer : l’un exprime la proteine beta-amyloide humaine mutee (souris APP), l’autre une proteine tau humaine doublement mutee (souris tg30 ; tau 1N4R double-mutante P301S et G272 V).
Databáze: OpenAIRE
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