OPTIMIZACIÓN DE UNA TÉCNICA PARA LA EXTRACCIÓN DE UN ADN DE HECES DE VICUÑA (Vicugna vicugna mensalis)

Autor: M L Juan Aguilar, H Lenin Maturrano, Jane V. Wheeler, D Paloma Krüger, I Jesús Chávez, A Raúl Rosadio
Rok vydání: 2012
Předmět:
Zdroj: Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú. 23
ISSN: 1609-9117
1682-3419
DOI: 10.15381/rivep.v23i3.918
Popis: Actualmente es posible determinar el estatus de especies silvestres mediante el analisis de ADN extraido de muestras no invasivas como las heces. Aunque dichos analisis suelen ser dificultosos debido principalmente a la composicion y conservacion de las heces, se ha demostrado en muchas especies que con el desarrollo de metodos adecuados de extraccion es posible maximizar la fiabilidad y eficacia de este procedimiento. Por tanto, el objetivo del presente estudio fue optimizar un metodo de extraccion de ADN de heces de vicuna Vicugna vicugna mensalis, especie clasificada como casi amenazada en el Peru, con la finalidad de obtener ADN de suficiente calidad para analisis moleculares. Se recolectaron 51 muestras de heces durante los meses de agosto y septiembre de 2008 en dos comunidades vicuneras ubicadas a mas de 4600 msnm en los departamentos de Junin y Moquegua. Luego de observar la defecacion, las muestras fueron recolectadas en forma inmediata, conservadas en etanol y transportadas al laboratorio para la extraccion del ADN. El kit comercial QIAamp® DNA Stool Mini Kit (QIAGEN) fue modificado para incluir un vigoroso y extenso proceso de agitacion y los resultados fueron comparados con dos protocolos comunmente utilizados: fenol/cloroformo/alcohol isoamilico y el mismo kit QIAGEN. La cantidad del ADN extraido fue observado en electroforesis horizontal en geles de agarosa, y la calidad evaluada mediante la amplificacion y visualizacion de los tamanos esperados de los microsatelites YWLL46 y LCA19. Aunque se logro extraer ADN con los tres metodos, solamente el metodo modificado permitio obtener ADN de suficiente calidad para ser utilizado en pruebas moleculares. Palabras clave: extraccion de ADN, heces, vicuna
Databáze: OpenAIRE
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