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Este estudo teve por objetivo implantar um protocolo de amplificacao genomica, precedida de transcricao reversa (RT-PCR) para o gene da nucleoproteina do virus da raiva, para a utilizacao dessa metodologia em laboratorios onde sao realizadas investigacoes para a deteccao do virus rabico. Foram utilizadas 50 amostras de tecido encefalico de animais (44 bovinos, 5 equinos e 1 quiroptero) oriundos do Estado do Rio de Janeiro, positivos por imunofluorescencia direta e/ou prova biologica para o virus rabico. A extracao do RNA foi feita a partir da suspensao a 10% em PBS pH7,2 do tecido encefalico utilizando-se a metodologia de TRIzolTM (Life Technologies) e o protocolo de RT-PCR descrito por Heaton et al. (1997), incluindo algumas modificacoes. Dentre as 50 amostras analisadas, 50 foram positivas pela prova biologica e pela RT-PCR e destas, 49 foram positivas pela imunofluorescencia direta. Estes resultados demonstram ser este protocolo de RT-PCR uma metodologia sensivel, especifica, rapida e extremamente valiosa, podendo ser utilizada como rotina em laboratorios que trabalham no diagnostico de virus rabico. |
