Comparison of methods of enzyme immunoassay and mass spectrometry for determining the concentration of human alpha-1-antitrypsin

Jazyk: ruština
Rok vydání: 2021
Předmět:
DOI: 10.18720/spbpu/3/2021/vr/vr21-3119
Popis: Данная работа описывает сравнение Ð´Ð²ÑƒÑ Ð¼ÐµÑ‚Ð¾Ð´Ð¾Ð² (иммуноферментного анализа (ИФА) и масс-спектрометрии) для определения концентрации альфа-1-антитрипсина (А1АТ) в сыворотке крови человека. А1АТ является белком острой фазы (то есть его концентрация возрастает при Ñ€Ð°Ð·Ð»Ð¸Ñ‡Ð½Ñ‹Ñ Ð²Ð¾ÑÐ¿Ð°Ð»Ð¸Ñ‚ÐµÐ»ÑŒÐ½Ñ‹Ñ Ð¿Ñ€Ð¾Ñ†ÐµÑÑÐ°Ñ , которые протекают в организме), поэтому быстрое и точное определение его концентрации позволяет использовать эти данные для анализа протекания сепсиса у больного, а также помогает в диагностике Ñ€Ð°Ð·Ð»Ð¸Ñ‡Ð½Ñ‹Ñ Ð·Ð°Ð±Ð¾Ð»ÐµÐ²Ð°Ð½Ð¸Ð¹ Ð»ÐµÐ³ÐºÐ¸Ñ . На данный момент концентрацию А1АТ человека определяют с помощью иммуноферментного анализа, однако этот метод имеет ряд недостатков – наиболее важным из Ð½Ð¸Ñ ÑÐ²Ð»ÑÐµÑ‚ÑÑ скорость проведения анализа - результат можно получить только спустя сутки. Так как быстрое и точное определение концентрации А1АТ играет большую роль в современной медицине, было предложено использовать для этого масс-спектрометрический метод, который основан на взаимодействии трипсина с его основными ингибиторами – альфа-1-антитрипсином и альфа-2-макроглобулином, от которого при взаимодействии с трипсином отщепляется пептид. Данный метод был отработан на ÑÑ‹Ð²Ð¾Ñ€Ð¾Ñ‚ÐºÐ°Ñ ÐºÑ€Ð¾Ð²Ð¸ контрольной группы, Ð±Ð¾Ð»ÑŒÐ½Ñ‹Ñ Ñ ОРВИ и Ð±Ð¾Ð»ÑŒÐ½Ñ‹Ñ Ð² септическом состоянии. Полученные значения концентрации А1АТ были значительно выше у пациентов с сепсисом. Результаты, полученные с помощью метода масс-спектрометрического анализа, сравнивались с результатами после проведения эксперимента с помощью ИФА, при этом для образцов Ð²ÑÐµÑ Ñ‚Ñ€ÐµÑ Ð³Ñ€ÑƒÐ¿Ð¿ не было найдено ÑÑƒÑ‰ÐµÑÑ‚Ð²ÐµÐ½Ð½Ñ‹Ñ Ð¾Ñ‚Ð»Ð¸Ñ‡Ð¸Ð¹, что позволяет сделать вывод о том, что масс-спектрометрический метод позволяет точно определять концентрацию альфа-1-антитрипсина в сыворотке крови человека.
This work describes a comparison of two methods (enzyme immunoassay (ELISA) and mass spectrometry) for determining the concentration of alpha-1-antitrypsin (A1AT) in human serum. A1AT is an acute phase protein (that is, its concentration increases with various inflammatory processes that occur in the body), so a quick and accurate determination of its concentration allows you to use this data to analyze the course of sepsis in a patient, and also helps in the diagnosis of various lung diseases. At the moment, the concentration of human A1AT is determined using an enzyme immunoassay, but this method has a number of disadvantages – the result can be obtained only after a day. Since the rapid and accurate determination of the concentration of A1AT plays an important role in modern medicine, it was proposed to use a mass spectrometric method for this purpose, which is based on the interaction of trypsin with its main inhibitors – alpha-1-antitrypsin and alpha-2-macroglobulin, from which the peptide is cleaved off when interacting with trypsin. This method was tested on the blood sera of the control group, patients with ARVI and patients in a septic state. The obtained values of A1AT concentration were significantly higher in patients with sepsis. The results obtained by mass spectrometric analysis were compared with the results obtained after the experiment with ELISA, while no significant differences were found for the samples of all three groups, which allows us to conclude that the mass spectrometric method allows us to accurately determine the concentration of alpha-1-antitrypsin in human serum.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: