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The optical rotatory properties, amino acid composition, chromatographic fractionation, and enzymic inhibition activity of several trypsin inhibitors were investigated. The homogeneity of these proteins was tested by free boundary electrophoresis and sedimentation in the ultracentrifuge. A crude fraction of lima bean trypsin inhibitor was fractionated by diethylaminoethyl cellulose ion exchange chromatography into several subfractions. It was attempted to correlate the inhibiting capacity of the proteins with their chemical composition and gross configuration (conformation) of the macromolecules. On the basis of the optical rotatory dispersion results, it was concluded that the polypeptide chain conformation of the soybean trypsin inhibitor differs considerably from that of the two major inhibiting components found in the lima beans. Also it was found that ovomucoid exhibits an unusual decrease in levorotation upon denaturation in alkali, and that its dispersion constant differs strongly from the respective constants of the bean proteins. It was concluded that the inhibiting power is due neither to a specific gross configuration nor unique amino acid composition of the inhibitors, but that only short segments of the chains of both the trypsin and inhibitor are essential for the interaction that leads to inactivation of the enzyme. Das optische Drehungsvermogen, der Gehalt an Aminosauren, die chromatographische Fraktionierung, und das enzymatische Inhibitionsvermogen von einigen Trypsin-Inhibitoren wurde untersucht. Die Einheitlichkeit der Proteine wurde durch Elektrophorese und Sedimentation in der analytischen Ultrazentrifuge bestimmt. Eine Proteinfraktion von Lima-Bohnen, die die Trypsin-Hydrolyse hemmte, wurde mit Hilfe der Chromatographie auf Diathylaminoathyl-Cellulose fraktioniert, und die Eigenschaften der Fraktionen wurden untersucht. Es wurde versucht, die Hemmungskapazitat der Proteine mit der chemischen Zusammensetzung und Konfiguration (Konformation) der Makromolekule in Zusammenhang zu bringen. Auf Grund der Resultate der Rotationsdispersion wurde die Schlusfolgerung gezogen, das die Konformation der Polypeptidketten (Konfiguration der Makromolekule) in den verschiedenen Inhibitoren sehr verschieden ist. Der Soja-Bohnen-Trypsin-Inhibitor hat eine ungewohnlich niedrige Dispersionskonstante, und die Losungen sind stark linksdrehend. Die Lima-Bohnen-Inhibitoren haben hohere Werte fur die Dispersionskonstanten, und die Losungen sind schwach linksdrehend. Der Inhibitor von Huhnereiweis (Ovomucoid) gibt stark linksdrehende Losungen, die Linksdrehung vermindert sich in einer abnormalen Weise bei der Denaturierung. Die Aminosaurezusammensetzung der verschiedenen Inhibitoren ist auch sehr verschieden. Diese Befunde zeigen, das die Hemmung des Trypsins durch die verschiedenen Inhibitoren unabhangig von der Zusammensetzung sowie der Konformation der Polypeptidketten des ganzen Makromolekuls ist. Es kann angenommen werden, das nur einige kurze Kettensegmente, die eine spezifische Zusammensetzung und Konfiguration haben mussen, fur die Hemmung notwendig sind. |
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