Gewinnung hochaffin bindender Proteine für den Östrogenrezeptortest aus lösungsmittelextrahiertem Lammuteruspulver

Autor: U. Roth, B. Schlatterer
Rok vydání: 2010
Zdroj: Zentralblatt für Veterinärmedizin Reihe A. 30:601-606
ISSN: 0177-0543
DOI: 10.1111/j.1439-0442.1983.tb01022.x
Popis: Zusammenfassung Durch Lyophilisation und Losungsmittelextraktion von Lammuterus-Gewebepulver wird ein lagerfahiges und leicht handhabbares Ausgangsmaterial zur Herstellung eines Bindungsreagenzes fur ostrogenwirksame Hormone gewonnen. Die Konzentration an Bindungsstellen fur 17β-Ostradiol ist etwa um den Faktor 10 hoher als bei direkter Extraktion von frischem oder gefrorenem Gewebe bezogen auf den Proteingehalt. Die Affinitat fur 17β-Ostradiol wird durch die Vorbehandlung mit Losungsmitteln erhoht. Im Gewebe enthaltene lipophile Substanzen einschlieslich endogener Hormone werden durch die Losungsmittelbehandlung entfernt. Summary Obtaining proteins of high binding affinity for testing oestrogen receptors by means of a lamb uterine powder extracted with solvent By lyophilization and solvent extraction of powdered lamb uterine tissues a marketable and easily handled binding reagent for oestrogenic hormones was obtained. The concentration of binding sites for 17β-oestradiol is higher by a factor of 10 than that obtained by direct extraction of fresh or frozen tissues, relative to protein content. Affinity for 17β-oestradiol is increased by the pre-treatment and the solvents. Lipophilic substances, including endogenous hormones, in the tissue are removed by the solvent treatment. Resume Obtention de proteines de liaison a forte affinite pour le test de recepteurs des oestrogenes a partir d'une poudre d'uterus d'agneau extraite avec un solvant Un materiel conservable et facilement utilisable pour la preparation d'un reactif de liaison des hormones oestrogenes a ete obtenu a partir d'une lyophilisation et d'une extraction avec un solvant. La concentration en sites de fixation pour 17β-oestradiol est plus elevee d'un facteur d'a peu pres 10 que lors d'une extraction directe a partir d'un tissu frais ou congele rapporte au taux de proteines. L'affinite pour 17β-oestradiol est augmentee avec le pretraitement du solvant. Les substances lipophiles et des hormones endogenes contenues dans le tissu sont eliminees par le traitement avec le solvant. Resumen La obtencion de proteinas fijadoras harto afines para la prueba receptora de estrogenos a partir de polvo uterino de cordera extraido mediante disolventes Por medio de liofilizacion y extraccion con disolventes de tejido uterino pulverizado de cordera, se obtiene un material inicial almacenable y de manipulacion facil para elaborar un reactivo de fijacion para hormonas de accion estrogena. La concentracion en los lugares de fijacion para estradiol-17β es mayor en el factor 10 aprox. que con la extraccion directa a partir de tejido fresco congelado, referida al contenido en proteinas. La afinidad para estradiol-17β se aumenta mediante el pretratamiento con disolventes. Con el tratamiento a base de disolventes, se eliminan las substancias lipofilas, incluyendose las hormonas endogenas contenidas en el tejido.
Databáze: OpenAIRE