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A Caatinga e um bioma exclusivamente brasileiro, com fauna e flora peculiares, proporcionando assim um ambiente propicio para micro-organismos adaptaveis a nutricao e clima adversos. O processo de obtencao de enzimas atraves dos fungos por meio de fermentacao em estado solido e bastante viavel por manter o micro-organismo em condicoes que simulam o ambiente natural. Assim sendo, o presente trabalho teve como objetivo realizar a bioprospeccao de enzimas produzidas por Aspergillus tamarii URM4634 isolado do solo da caatinga. O micro-organismo foi mantido com o meio de cultura Czapek por 7 dias a 30°C ate ocorrer esporulacao. Os esporos foram coletados, padronizados na concentracao de 107 esporos/mL e inoculados no substrato de farelo de trigo (FT). A fermentacao em estado solido foi realizada contendo 5g de substrato FT, previamente autoclavado a 121°C por 20 minutos, com um teor de 40% de umidade, por 72 horas, a 30°C em câmara climatica. Apos a fermentacao foi extraido o extrato bruto (EB), adicionando Apos a fermentacao o extrato proteolitico foi obtido por adicao de 7,5 mL de fosfato de sodio 0,1M, pH 7,0 por grama de material fermentado e homogeneizado na mesa agitadora por 2 horas, submetido maceracao durante 1 minuto, agitacao orbital 5000 rpm durante 15 minutos a 4°C e em seguida filtrado/centrifugado. O EB foi analisado para diferentes atividades enzimaticas: protease, colagenase, endoglucanase, pectinase e frutosiltransferase. Nas determinacoes das atividades enzimaticas realizadas, verificou-se altos valores para protease com 116,6 U/mL, podemos destacar a producao de colagenase com 210,6 U/mL. Ainda pode ser verificada atividade de 0,41 (U/mL) de endoglucanase; 0,49 (U/mL) pectinases e 10,7 (U/mL) de frutosiltransferase. O perfil obtido apresentou nove bandas proteicas com pesos moleculares de 14,4 a 97,0 kDa. A natureza do composto proteolitico (enzima) foi confirmada por zimograma para as atividades de frutosiltransferase e protease, onde a banda hidrolisada branca correspondeu a posicao da frutosiltransferase, sendo visualizado duas bandas com pesos moleculares distintos, indicando assim a presenca de duas diferentes enzimas com a mesma atividade. Para a atividade proteolitica foi observado a presenca de apenas uma banda. Os resultados demostraram que A. tamarii URM4634, foi capaz de produzir todas as enzimas testadas, com substrato de baixo custo utilizando subprodutos agroindustriais. Tendo um maior potencial de utilizacao industrial para as proteases, no qual foi obtido altos valores de atividade, em destaque para a producao de colagenases. |
