Caracterização e clonagem do gene uvrA de Corynebacterium pseudotuberculosis, agente infeccioso da linfadenite caseosa

Autor: Carlos Renato Machado, Luciana Lara dos Santos, Vasco Azevedo, Debora de Oliveira Lopoes, Rafael Cançado de Faria, Bárbara Catarina Teodoro Castro, Anderson Miyoshi, Bruno Carvalho Resende
Rok vydání: 2013
Předmět:
Zdroj: BBR - Biochemistry and Biotechnology Reports. 2:24
ISSN: 2316-5200
DOI: 10.5433/2316-5200.2013v2n2espp24
Popis: A Linfadenite caseosa e uma doenca causada por Corynebacterium pseudotuberculosis que afeta ovinos e caprinos. O Reparo de DNA e vital para qualquer organismo, pois evita possiveis efeitos deleterios. O objetivo deste estudo foi caracterizar o gene uvrA de C.psudotuberculosis para futuros ensaios de complementacao funcional. Analises in silico foram feitas para verificar os parâmetros fisicos e quimicos, busca por dominios conservados e modelagem da estrutura 3D. As analises mostram que a proteina tem um peso molecular de cerca de 104,3 kDa e um dominio conservado de exonuclease. A amplificacao do gene uvrA foi realizada utilizando um kit de PCR Long Range e o inserto foi clonado no vetor pCR 2.1 TOPO. Linhagens de E. coli DH5a foram eletroporadas com o plasmideo recombinante e depois estes foram digeridos com enzimas de restricao BamH1 e Xho1 para subsequente clonagem num vetor de expressao pProEX HTB. As construcoes serao confirmadas por sequenciamento.
Databáze: OpenAIRE