| Popis: |
Paraoksonaz (PON1; E.C.3.1.8.1), karaciğerde sentezlenir ve spesifik substratı olan paraoksonu hidroliz eder. Yüksek yoğunluklu lipoprotein (HDL)’ne bağlı arilesterazlar grubundan bir enzimdir. Bu çalışmanın amacı, sıklıkla kullanılan antibiyotik ilaçların sultamisilin, sefdinir, vankomisin hidroklorür ve kolistimetat sodyum etken maddelerinin insan serumunda bulunan PON1 enzim aktivitesi üzerine in vitro etkilerini araştırmaktır. İnsan serumundan PON1 enzimi amonyum sülfat çöktürmesi (%60-80 aralığında), iyon değişim kromatografisi ve jel filtrasyon kromatografisi teknikleri kullanılarak %44,6 verimle yaklaşık 320,7 kat saflaştırıldı. Etken maddelerin inhibisyon etkilerini incelemek üzere enzimin 412 nm’deki paraoksonaz aktivitesine bakıldı. Substrat olarak paraokson kullanıldı. PON1 enzimi için sultamisilin ve vankomisin hidroklorür yarışmasız inhibisyon gösterirken, sefdinir yarı yarışmalı inhibisyon, kolistimetat sodyum ise yarışmalı inhibisyon etkisi gösterdi. Ki değerleri ise sultamisilin için 38.3 mM; vankomisin hidroklorür için 5.08 mM; sefdinir için 0.86 mM ve kolistimetat sodyum için 17.01 µM olarak hesaplandı. Bu sonuçlara göre enzim aktivitesi üzerine etki gösteren ilaç etken maddelerinin içinde, enzim aktivitesini düşük konsantrasyonda %50 azaltması ile PON1 enzimi üzerinde de en kuvvetli inhibitör kolistimetat sodyum (IC50: 13.59 µM) olarak tespit edildi. |
