| Popis: |
Amilazlar; bitkiler, hayvanlar ve mikroorganizmalar tarafindan uretilen nisastayi parcalayan enzimlerdir. Mikroorganizmalar tarafindan uretilen amilazlar; eczacilik, gida, deterjan, tekstil, kagit ve kagit hamuru endustrisi gibi cok cesitli endustriyel uygulamalarda kullanilabilme ozelligine sahiptir. Bununla birlikte, amilaz ureten mikroorganizmalarin izolasyonunda hala kisitlamalar vardir. Isgin bitkisi tip basta olmak uzere bircok alanda kullanilan onemli bir bitkidir. Bu calismanin amaci yararli isgin bitkisinden bakterinin izolasyonu gerceklestirerek biyoteknolojik oneme sahip olan amilazin elde edilmesidir. Bakteri izolasyonu dilusyon teknigi kullanilarak yapildi. Bitki kok kisminda bulunan toprak alinarak seyreltme islemi gerceklestirildi. Izolasyon sonrasi morfolojik, fizyolojik ve biyokimyasal testler yapildi. Mikroorganizmanin tur teshisi icin 16 S rRNA analizi gerceklestirildi. Bakteri sekans analiz sonucunda 864 baz ciftine sahip Bacillus atrophaeus oldugu tespit edildi. Tanimlamada etkili olan biyokimyasal testler sonucunda bakterinin gram pozitif (+), basil ve hareketsiz oldugu belirlendi. Katalaz, hemoliz ve glikoz un pozitif (+) sonuc verdigi; oksidaz, H 2 S ve indol gibi biyokimyasal testlerin negatif (-) oldugu tespit edildi. Oncelikle bakteri uremesinin optimizasyonu saglandi. Zaman, sicaklik ve pH gibi bakteri uremesine dogrudan etki eden onemli parametreler calisildi. Optimum bakteri uretimi sirasiyla 72.saat, 30 o C ve pH 6.0 belirlendi. Guclu amilaz uretimini belirlemek amaciyla nisastali kati besi yerinde bakteriler uretildi. Inkubasyon sonrasi lugol cozeltisi kullanilarak mikroorganizmanin amilaz urettigi tespit edildi. Amilaz sentezlendigi belirlenen bakterinin optimal uretim kosullari tespit edildi. Bacillus atrophaeus ’tan α-amilaz’in maksimum uretim kosullari 36. saat, 35 o C ve pH 6.0 oldugu goruldu. Optimum sartlarda uretilen bakterinin supernatant kismi kullanilarak enzim karakterizasyonu gerceklestirildi. Enzim sicaklik ve pH’si sirasiyla 40 o C ve pH 6.0 da maksimum aktivite gosterdigi tespit edildi. Bu tespitler sonucunda istenilen bakteri elde edildi. Tanimlanan ve amilaz urettigi tespit edilen bakteri, farkli biyoteknolojik alanlarda kullanilma ozelligine sahip oldugu belirlendi. |
