Development of a Reverse-Transcription PCR (RT-PCR) for the Detection of HIV-1 RNA in Single Blood Donations
Autor: | H. Fiedler, J. Ennen, Elke Folchert, M. Giesing, V Schottstedt, W Tuma, G. Bünger |
---|---|
Rok vydání: | 1995 |
Předmět: | |
Zdroj: | Transfusion Medicine and Hemotherapy. 22:95-97 |
ISSN: | 1660-3818 1660-3796 |
Popis: | Das Ziel dieser Studie war es, Methoden zu entwickeln, die einen kostengünstigen Einsatz einer validierten PCR-Analytik zum Nachweis von transfusionsmedizinisch relevanten Viren (HIV-1, HAV, HBV, HCV, Parvo B19) in Einzelblutspenden ermöglichen. Die HIV-1 -RT-PCR wurde als Modellsystem zur Testvalidierung bezüglich Sensitivität und Spezifität eingesetzt. Es wurden insgesamt 600 kodierte EDTA-Blutproben, von denen 6 mit HIV-1 -Viren (Viruskonzentration 0,1 TCID50/ml) gespiket waren, in 6 Pools zu je 100 Spenden zusammengefaβt. Nach Viruskonzentration mittels Ultrazentrifuge wurden die Nukleinsäuren isoliert und anschlieβend in 3 verschiedenen HIV-1-PCR-Systemen amplifiziert und analysiert. Durch anschlieβende PCR-Analysen wurden die 6 gespiketen Serumproben fehler-frei erkannt. Es konnte zusätzlich gezeigt werden, daβ Serumpools (lOOEinzelspenden), die mit je einem HCV-, HBV-, HAV- und Parvo-B19-Virus-positiven Serum kontaminiert waren, mit Hilfe von 4 verschiedenen PCR-Analysen richtig erkannt wurden. |
Databáze: | OpenAIRE |
Externí odkaz: |