Development of a Reverse-Transcription PCR (RT-PCR) for the Detection of HIV-1 RNA in Single Blood Donations

Autor: H. Fiedler, J. Ennen, Elke Folchert, M. Giesing, V Schottstedt, W Tuma, G. Bünger
Rok vydání: 1995
Předmět:
Zdroj: Transfusion Medicine and Hemotherapy. 22:95-97
ISSN: 1660-3818
1660-3796
Popis: Das Ziel dieser Studie war es, Methoden zu entwickeln, die einen kostengünstigen Einsatz einer validierten PCR-Analytik zum Nachweis von transfusionsmedizinisch relevanten Viren (HIV-1, HAV, HBV, HCV, Parvo B19) in Einzelblutspenden ermöglichen. Die HIV-1 -RT-PCR wurde als Modellsystem zur Testvalidierung bezüglich Sensitivität und Spezifität eingesetzt. Es wurden insgesamt 600 kodierte EDTA-Blutproben, von denen 6 mit HIV-1 -Viren (Viruskonzentration 0,1 TCID50/ml) gespiket waren, in 6 Pools zu je 100 Spenden zusammengefaβt. Nach Viruskonzentration mittels Ultrazentrifuge wurden die Nukleinsäuren isoliert und anschlieβend in 3 verschiedenen HIV-1-PCR-Systemen amplifiziert und analysiert. Durch anschlieβende PCR-Analysen wurden die 6 gespiketen Serumproben fehler-frei erkannt. Es konnte zusätzlich gezeigt werden, daβ Serumpools (lOOEinzelspenden), die mit je einem HCV-, HBV-, HAV- und Parvo-B19-Virus-positiven Serum kontaminiert waren, mit Hilfe von 4 verschiedenen PCR-Analysen richtig erkannt wurden.
Databáze: OpenAIRE