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Introdução: A análise da textura do núcleo das células por meio do cálculo da dimensão fractal (DF) vem sendo utilizada como ferramenta diagnóstica de cânceres, bem como para avaliar os efeitos biológicos das radiações e de outros agentes (1, 2). Esse método se baseia na informação de que a cromatina possui dimensão não inteira ou fractal, com características de autossimilaridade e invariância de escala (1, 3, 4). Quando expostas a agentes agressores, as células podem apresentar graus distintos de condensação da cromatina, indicativo de que foi alterada. Em se tratando de radiobiologia, atualmente, o interesse crescente é pelos danos às células-tronco, dada a aplicação desse tipo celular em medicina regenerativa, e por servirem de modelo de efeitos ao tecido jovem. Objetivo: Utilizar o cálculo da dimensão fractal do núcleo das células-tronco mesenquimais humanas (CTMH) como método para avaliar o dano radioinduzido à cromatina. Métodos: Essa pesquisa foi aprovada pelo Comitê de Ética e Pesquisa em Seres Humanos – CCS/UFPE (parecer: 2.259.272). As células foram coletadas de cordão umbilical humano e cultivadas no Laboratório de Biofísica das Membranas e Células-tronco Prof. Oleg Krasilnikov (UFPE). As CTMH foram irradiadas in vitro utilizando uma fonte de cobalto-60 com a dose de 3 Gy (taxa de dose de 2,657 kGy/h) (DEN/UFPE). Foram utilizadas 40 células, divididas entre os dois grupos de CTMH analisados: o grupo não irradiado (NR) e o grupo irradiado (IR); obtendo-se imagens em dois tempos de cultura: Dia 1 e Dia 3 após a irradiação. As imagens foram processadas por meio do software ImageJ (NIH, EUA), utilizando o plugin FracLac. Foi realizado teste estatístico das médias. Resultados: No Dia 1, a média do grupo NR foi 1,76 ± 0,02 e no Dia 3 foi 1,73 ± 0,08. Já o grupo IR, no Dia 1 obteve média 1,76 ± 0,02 e no Dia 3 média 1,76 ± 0,04. Os valores de DF do núcleo de CTMH irradiadas não modificam com relação às do grupo NR, ou seja, o dano radioinduzido não foi detectado por este método morfométrico, considerando os tempos avaliados. Conclusão: O cálculo da dimensão fractal não é um bom método para detecção de alterações na cromatina das CTMH nas primeiras 72 horas após irradiação. |
