Evaluation of fermenting grape must yeast dynamics by SSCP profiles

Autor: Duarte, Filomena L., Baleiras-Couto, Margarida
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2012
Předmět:
Zdroj: Ciência e Técnica Vitivinícola v.27 n.2 2012
Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC)-FCT-Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
Ciência e Técnica Vitivinícola, Volume: 27, Issue: 2, Pages: 101-95, Published: DEC 2012
Popis: Alcoholic fermentation of grape must is a dynamic process involving diverse yeast populations which play an important role in wine characteristics. In order to enable a permanent control by the oenologist rapid and low cost methodologies to identify the species of yeasts present during fermentation should be implemented. Single Strand Conformation Polymorphism technique (SSCP), targeting D1 and D2 domains of 26S rDNA, was tested to differentiate wine yeast species. SSCP profiles were produced for 17 collection strains belonging to 15 different wine related yeast species. The technique was further investigated for the identification of yeasts inoculated to sterile grape must as single or in mixtures of two different species. Identical SSCP profiles were obtained from yeasts grown in grape must and in conventional growth media. SSCP allowed obtaining species specific bands, and SSPC profiles from grape must inoculated with mixtures of two strains revealed the presence of specific bands of both species. Direct SSCP yeast analysis of a spontaneous fermenting must carried out after 48 and 192 h of fermentation, enabled to compare the yeast community at two different periods of fermentation. SSCP profiles showed the presence of bands from species associated with the beginning and the end of fermentation, respectively at 48 and 192 h of fermentation. We conclude that SSCP is a quite promising methodology to monitor yeast populations present during grape must fermentation, which revealed to be easy to implement and low-priced. A fermentação alcoólica do mosto de uva é um processo dinâmico que envolve diversas populações de leveduras que desempenham um papel importante nas características do vinho. A fim de permitir um controle permanente pelo enólogo urge implementar metodologias rápidas e de baixo custo, para identificação das espécies de leveduras envolvidas na fermentação. O método de Polimorfismo de Conformação do DNA de Cadeia Simples (SSCP) visando os domínios D1 e D2 da região 26S do rDNA foi testado para diferenciar espécies de levedura associadas ao vinho. Foram determinados perfis de SSCP para 17 estirpes de coleção pertencentes a 15 espécies diferentes associadas a ambientes vínicos. A técnica foi depois testada para a identificação de leveduras inoculadas em mosto estéril utilizando uma única espécie ou em misturas de duas espécies diferentes. Foram obtidos perfis idênticos de SSCP a partir de leveduras cultivadas em mosto de uva e em meios de cultura convencionais. A análise de SSCP permitiu a obtenção de bandas específicas de cada espécie, e os perfis de SSPC obtidos a partir de mosto de uva inoculado com misturas de duas estirpes de espécies diferentes revelou a presença de bandas específicas de ambas as espécies. A análise direta por SSCP das leveduras presentes numa fermentação espontânea, realizada após 48 horas e 192 h de fermentação, permitiu comparar a comunidade de leveduras em dois períodos diferentes de fermentação. Os perfis de SSCP revelaram a presença de bandas de espécies associadas com o início e com o fim da fermentação, respetivamente às 48 e às 192 h de fermentação. Em conclusão, a análise SSCP é uma metodologia bastante promissora para monitorizar as populações de leveduras presentes durante a fermentação, que se mostrou ser de fácil aplicação e de baixo custo.
Databáze: OpenAIRE
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