Conversión de la porina OmpF de Escherichia coli en una adhesina específica de péptidos amiloidogénicos

Autor: Giraldo, R., Vendrell-Fernández, Sol, Lozano-Picazo, Paloma, Cuadros-Sánchez, Paula, Tejero-Ojeda, María M.
Přispěvatelé: Agencia Estatal de Investigación (España), Giraldo, R., Vendrell-Fernández, Sol, Lozano-Picazo, Paloma, Tejero-Ojeda, María M., Giraldo, R. [0000-0002-5358-7488], Vendrell-Fernández, Sol [0000-0003-0153-8454], Lozano-Picazo, Paloma [0000-0002-6424-4317], Tejero-Ojeda, María M. [0000-0003-2275-8309]
Jazyk: Spanish; Castilian
Rok vydání: 2021
Zdroj: Digital.CSIC. Repositorio Institucional del CSIC
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Popis: 1 p.
Las proteínas amiloides están presentes en entornos naturales, bien sea debido a su secreción por microorganismos o a las excretas de mamíferos afectados por enfermedades priónicas, suscitando preocupación creciente por su potencial infectividad y toxicidad en contextos como la microbiota intestinal o los suelos. Nuestro objetivo es diseñar, a partir de proteínas de la membrana externa de bacterias Gram-negativas, biosensores y adhesinas sintéticos específicos de amiloides, con vistas a su posible neutralización. La inserción de un segmento amiloidogénico del amiloide funcional bacteriano RepA-WH1 (1) en uno de los lazos extracelulares de la (abundante y no esencial) porina OmpF de Escherichia coli permitió a las bacterias unir en su superficie esa misma secuencia cuando se suministra en forma de péptido marcado con rodamina. Esta interacción homotípica es característica de los ensamblajes amiloides, y se asemeja a la responsable de la formación de pares RepA-RepA, mediados por el dominio amiloidogénico WH1, que actúan como inhibidores de la replicación prematura de plásmidos (2). Polifenoles conocidos por su actividad como inhibidores del ensamblaje de diversos amiloides impidieron el reconocimiento del péptido por parte de la porina sintética. Cuando la proteína RepA-WH1 completa (etiquetada en su extremo C-terminal con mCherry) se inmovilizó sobre portaobjetos de vidrio activados con N-hidroxisuccinimida, las bacterias que expresan la variante sintética de OmpF se unieron a dicha superficie funcionalizada, demostrando así el potencial de la amiloidogénesis como mediadora de la adhesión celular.1.Giraldo R. mSystems (2020) 5:e00553-20.2. Molina-García L, et al. Sci Rep (2016) 6:25425.
AEI (RTI2018-094549-B-I00)
Databáze: OpenAIRE
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