Hibridación in situ del virus respiratorio syncytial bovino en pulmón de cordero a diferentes tiempos postinfección

Autor: REDONDO,E., GOMEZ,L., KELLING,C. L., GAZQUEZ,A., MASOT,A. J.
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2003
Předmět:
Zdroj: Archivos de Medicina Veterinaria; Vol. 35 Núm. 1 (2003); 37-49
Archivos de medicina veterinaria, Volume: 35, Issue: 1, Pages: 37-49, Published: JAN 2003
Archivos de medicina veterinaria v.35 n.1 2003
SciELO Chile
CONICYT Chile
instacron:CONICYT
ISSN: 0301-732X
0717-6201
Popis: We studied the distribution of bovine respiratory syncytial virus (BRSV) RNA in lungs of experimentally infected sheep by in situhybridization at different times postinfection. The probe used for in-situ hybridization was prepared by reverse transcription of BRSV RNA, followed by PCR amplification of the cDNA. Twenty five Merino sheeps of both sexes with a live weight of 55± 10 Kg, received a intratracheal inoculation of 40 ml saline solution containing 1.26 x 106TCID50BRSV (strain NMK7) per ml. Sheep were slaughtered 1,3,7,11 and 15 postinoculation days (PID). Bronchial and bronchiolar epithelial cells were positive for BRSV nucleic acid by ISH at 1, 3, 7 and 11 PID. However, alveolar epithelial cells contained positive hybridization signals cells at 1,3 and 7 PID. Cells containing viral RNA were detected from 1 to 11 PID, in exudate within bronchial and bronchiolar lumina; and from 3 to 7 PID in alveolar exudates. Positive hybridization signals were identified in interstitial mononuclear cells and in bronchi associated lymphoid tissue from 3 to 11 PID. The highest signal intensity of positive cells were observed at 3 and 7 PID, coinciding with high virus antibodies titres and with the most important histopathological findings.
Se estudió, mediante la técnica de hibridación in situ, la distribución del ARN viral del virus respiratorio Sincicial Bovino (VRSB) en pulmón de corderos infectados en forma experimental, a diferentes tiempos postinoculación. La sonda usada para la hibridación in situ se preparó mediante transcripción reversa del ARN del VRSB, seguida de la amplificación mediante PCR de cADN. 25 corderos de raza Merino de ambos sexos y de un peso vivo de 55 (+/- 10) Kg, fueron inoculados por vía intratraqueal con 40 ml de solución salina que contenía 1.26 x 106DIM50por ml (cepa viral NMK7). Los corderos se sacrificaron los días 1, 3, 7, 11 y 15 postinoculación. Las células epiteliales bronquiales y bronquiolares resultaron positivas a los ácidos nucleicos de VRSB los días 1, 3, 7 y 11 postinoculación. A su vez, el epitelio alveolar contenía células positivas los días 1, 3, y 7 postinoculación. Se detectaron células que contenían el ARN viral en las luces bronquiales y bronquilares del día 1 al 11 postinoculación, y en el exudadado alveolar en los días 3 y 7 postinoculación. Se identificaron señales positivas de hibridación desde el día 3 al 11 postinoculación, tanto en las células intersticiales mononucleares como en el tejido linfoide asociado a los bronquios. Las señales de hibridación más intensas se detectaron a los días 3 y 7 postinoculación, lo que coincidió con las lesiones histopatológicas de mayor consideración.
Databáze: OpenAIRE
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