Assessment of the in vitro effect of antibodies induced by peptido-mimetics derived from the Plasmodium merozoite surface protein-2 in malaria caused by P. berghei and P. yoelii in BALB/c mice
| Autor: | Lesmes, Liliana Patricia, Gallego, Gina Marcela, Carreño, Luisa Fernanda, Hoebeke, Johan, Lozano, Jose Manuel |
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| Jazyk: | Spanish; Castilian |
| Rok vydání: | 2010 |
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| Zdroj: | Repositorio EdocUR-U. Rosario Universidad del Rosario instacron:Universidad del Rosario Repositorio UN Universidad Nacional de Colombia instacron:Universidad Nacional de Colombia |
| Popis: | Con base en estudios realizados previamente en los cuales se identificaron los residuos críticos para la unión de la secuencia 21 KNESKYSNTFINNAYNMSIR 40 del antígeno MSP-2 del Plasmodium falciparum, se diseñaron y sintetizaron dos secuen- cias de pseudopéptidos amida reducida en las cuales se sustituyó un enlace peptídico normal por su isóstero ?[CH2 -NH] entre los residuos fenilalanina-isoleucina y entre los residuos isoleucina-asparagina, para dar lugar a los análogos codificados ?-128 (forma monomérica), ?-129 (forma polimérica), ?-130 (forma monomérica) y ?-131 (forma polimérica). Con los péptido-miméticos obtenidos en forma de polímero se inmunizaron ratones BALB/c para generar anticuerpos monoclonales que presentaron isotipo IgM. Mediante ensayos controlados de inmunización in vitro se indujo el cambio isotipo de los clones reactivos aislados de los hibridomas obtenidos de manera reproducible. Las inmunoglobulinas aisladas se ensayaron por su capacidad funcional neutralizadora de la infección controlada in vitro de cepas de Plasmodium de roedores a glóbulos rojos. Los resultados obtenidos evidencian el papel que pueden tener los anticuerpos inducidos por péptido-miméticos Plasmodium en ensayos de infección realizados en modelos animales de experimentación. Based on previous studies in which those residues being critical for Plasmodium falciparum binding to red blood cells (RBCs) through the antigenic sequence ( 21 KNESKYSNTFINNAYNMSIR 40 ) from the merozoite surface antigen-2 (MSP-2) were identified, we have designed and synthesized two reduced amide pseudopeptide sequences based on the 31 IN 32 binding motif. Synthesized peptido- mimetics, possess each one a modified peptide bond that presented as a ? [CH2-NH] reduced amide isoster bond, to allowing the Phe-Ile modified aminoacid pair allowing pseudopeptides coded ?-128 (monomer form) and ?-129 (polymer form) and the Ile-Asn modified aminoacid pair for pseudopeptides coded ?-130 (monomer form) and ?-131 (polymer form). By using the polymer forms of both peptido-mimetics as immunogens, monoclonal antibodies were produced in BALB/c mice. These Ig showed an IgM isotype. The isotype antibody switching was lead by in vitro immunization of the original hybridomas. Isolated immunoglobulins were tested for their functional in vitro activity, on a infection controlled experiment of rodent Plasmodium strains infecting red blood cells. Obtained results reveal the role played by anti- bodies to peptido-mimetic in infection assays performed further on animal experimental models. |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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