Expresión de la Actividad Glutamina Sintetasa durante el Desarrollo de la Retina del Pollo

Autor: González Gallego, María Auxiliador
Přispěvatelé: Prada Elena, Francisco Andrés, Quesada Ruiz, Adela, Universidad de Sevilla. Departamento de Anatomía y Embriología Humana
Jazyk: Spanish; Castilian
Rok vydání: 2017
Zdroj: idUS. Depósito de Investigación de la Universidad de Sevilla
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Popis: La enzima glutamina sintetasa juega un importante papel como intermediario metabólico catalizando la conversión de glutamato en glutamina y como regulador de los neurotransmisores glutamato y γ-aminobutirico (GABA) (Hertz y Schousboe, 1980; Cooper y col., 1983; McGeer y col., 1983). La GS se encuentra presente en la glia del SNC, astrocitos (Hamburger y col., 1987; Norenburg, 1979) y oligodendrocitos (D’Amelio y col., 1990), en la retina se localiza en la célula de Müller (Pow y col., 1993), y su actividad enzimática parece ser paralela al desarrollo de esta célula glial (Chader, 1971). En el presente trabajo hemos intentado esclarecer y determinar: 1) Si la diferenciación morfológica de la célula de Müller es la causante de la inducción de la actividad GS. 2) Si la enzima GS se localiza exclusivamente en la célula de Müller. Para lo cual hemos estudiado: 1) La diferenciación morfológica de las células de Müller, así como la presencia de otras células gliales ubicadas en la capa de células ganglionares y en la capa de fibras del nervio óptico. 2) Los cambios temporales en los niveles de actividad GS durante el desarrollo. 3) La localización de la expresión de inmunorreactividad GS durante el desarrollo. 4) La sinaptogénesis retiniana. El neurotransmisor exitador más utilizado por las neuronas en el SNC es el glutamato (Ehinger, 1989; Massey, 1990; Barnstable, 1993). Este es biosintetizado por la transmisión de su cetoácido correspondiente. Otra fuente importante para la obtención del glutamato es mediante su reciclado; una vez liberado por las neuronas, el glutamato es captado por las células gliales y amidatado a glutamina mediante la acción de la enzima glutamina sintetasa (GS). Esta enzima no sólo actúa como un intermediario metabólico en la transformación de glutamato a glutamina sino que también cumple una importante misión como regulador en el medio de los neurotransmisores glutamato y γ-aminobutírico (GABA). Se sabe que existe una correlación entre la actividad GS y la síntesis del ácido glutámico decarboxilasa (GAD) (Hertz y Schousboe, 1980; Cooper y col., 1983; McGeer y col., 1983), enzima necesaria para la formación del neurotransmisor inhibidor GABa a partir de la glutamina. La GS sólo se encuentra presente en los astrocitos (Hamburger y col., 1987; Noremberg, 1979) y oligodendrocitos (D’Amelio y col., 1990) del SNC. En el caso de la retina, se ha detectado su presencia en la glia radial representada por la célula de Müler (Pow y col., 1993). En el SNC, la actividad GS durante el desarrollo parece estar relacionada con la diferenciación morfológica de los astrocitos (Patel y col., 1983; Weir y col., 1984; Vernadakis y col., 1986; Wernicke y Volpe, 1986). En la retina el incremento de la actividad GS parece ser paralelo al desarrollo de la célula de Müller (Olney, 1968; Chader, 1971; La Vail y Reif-Lehrer, 1971; Chader y Reif-Lehrer, 1972; Moscona, 1972). Con objeto de comprobar in vivo la evolución de la actividad GS y su relación con la morfogénesis y diferenciación de la célula de Müller en la retina embrionaria del pollo, se estudió el desarrollo morfológico de esta célula a lo largo de todo el periodo embrionario y hasta después del nacimiento con las técnicas clásicas de microscopía óptica y electrónica. Durante esos mismos estadios se midió la actividad específica GS, con el fin de detectar los cambios temporales en los niveles de dicha actividad durante el desarrollo. Con objeto de comprobar si realmente la GS sólo se localizaba en las células de Müller de la retina de pollo, incubamos éstas con un anticuerpo monoclonal anti-glutamina sintetasa para detectar la localización de la expresión de inmunorreactividad GS. A su vez, se incubaron retinas de los mismos estadios, con el anticuerpo monoclonal 3CB2 como marcador específico glial. Por último, nos planteamos comprobar si realmente la actividad GS puede ser inducida previamente al elevar en el medio los niveles de 11β-hidroxicorticoesteroides, tal y como se ha propuesto en cultivos (Moscona y Piddington, 1966) o mediante su administración in ovo (Reif-Lehrer y Amos, 1968).
Databáze: OpenAIRE
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