Estudio de la respuesta inmunitaria-inflamatoria y oxidativa en pacientes y en un modelo experimental 'in vitro' de infección por el virus dengue

Autor: Levy Guiffrida, Alegría Cecilia
Přispěvatelé: Álvarez de Mon Soto, Melchor, Valero, Nereida, Universidad de Alcalá. Departamento de Medicina
Rok vydání: 2011
Předmět:
Zdroj: e_Buah Biblioteca Digital Universidad de Alcalá
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Popis: El dengue es una arbovirosis importante en países tropicales producido por un flavivirus. La infección por virus dengue induce varias alteraciones inmunológicas en el hospedador que podrían estar involucradas en la patogénesis de la enfermedad. No hay información clara acerca del papel de las células monocito/macrófago en la expresión incrementada de mediadores inflamatorios encontrados en infecciones por dengue. El objetivo de este estudio fue evaluar los mediadores inflamatorios de la respuesta inmunitaria en pacientes con infección por dengue y su significancia clínica, haciendo énfasis en la severidad de la enfermedad, el tipo de infección y el serotipo viral infectante. Además, evaluamos el efecto del virus dengue sobre la función y viabilidad de los monocitos infectados experimentalmente con virus dengue y bajo estímulo con LPS, procedentes de sangre de cordón umbilical de neonatos y de sangre periférica de adultos jóvenes y de ancianos. En este sentido, se determinó la concentración de citoquinas proinflamatorias (TNF-[alfa], IL-6 e IL-1[beta]), proteínas del complemento (C3 y C4), proteína C Reactiva (PCR) y oxido nítrico (NO) en 70 pacientes con dengue en fase aguda. Estos pacientes fueron clasificados de acuerdo a la severidad de la enfermedad según los criterios de la OMS en DC y DH, y el tipo de infección en infección primaria (IP) e infección secundaria (IS). El grupo control estuvo conformado por individuos sanos. Los niveles de citoquinas circulantes (TNF-[alfa], IL-6 e IL-1[beta]) y PCR se determinaron por ELISA; C3 y C4 por nefelometría, NO por el método de Griess y MDA por el método del ácido tiobarbitúrico. Se utilizaron los serotipos del virus aislados de los pacientes con dengue y cepas de referencia, los cuales fueron propagados en células de mosquito C6/36 HT, y titulados en células VERO por la Técnica de Plaqueo. En los ensayos in vitro, los cultivos de monocitos fueron cultivados con cepas de referencia del virus y estimulados con LPS por 1 y 3 días post-infección (PI). Se determinaron las citoquinas TNF-[alfa], IL-6 e IL-1[beta], el NO y MDA, utilizando el sobrenadante de los cultivos y catalasa (CAT), superóxido dismutasa (SOD) y glutatión reducido (GSH), en lisados celulares. Se determinó apoptosis por TUNEL. Nuestros resultados muestran incremento significativo en las concentraciones de TNF-[alfa] (p
Databáze: OpenAIRE
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