Nuevas estrategias para mejorar la calidad espermática en la criopreservación de la especie equina
| Autor: | Álvarez San Martín, Cristina, Gil Huerta, Lydia, González Orti, Noelia |
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| Jazyk: | Spanish; Castilian |
| Rok vydání: | 2021 |
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| Zdroj: | Zaguán. Repositorio Digital de la Universidad de Zaragoza instname |
| Popis: | Nuestros trabajos de investigación están dedicados al estudio de nuevos componentes y/o nuevas técnicas que permitan incrementar esta calidad espermática.En la primera experiencia se evaluó la adición de calostro de yegua en diluyentes para congelación de semen de caballos para mejorar la calidad espermática. Para ello se recogieron muestras de calostro de cuatro yeguas justo tras el nacimiento del potro y se determinó su composición y su calidad. Se recogieron eyaculados de nueve sementales fértiles con buena calidad seminal y tras llevar las muestras a la Facultad y realizar otra evaluación, fueron agrupadas y criopreservadas en tres grupos experimentales: diluyentes a base de lactosa complementada con calostro de yegua (20%), diluyentes a base de lactosa complementada con yema de huevo (20%),y BotuCrio. Después de la descongelación se hizo una contrastación para determinar la calidad de las muestras. La motilidad de los espermatozoides se evaluó mediantesistema computerizado ISAS Proiser, la viabilidad mediante SYBR-14 y tinción con yodo de propidio (PI), la integridad del acrosoma mediante isotiocianato de fluoresceína y aglutinina de maní (FITC-PNA) y tinción de PI, la funcionalidad de la membrana plasmática mediante el test hipoosmótico (HOS) y la desnaturalización del ADN mediante tinción de naranja de acridina (AO). En cuanto a los resultados obtenidos se observó que entre los diluyentes no hubo diferencias significativas en los porcentajes de motilidad total, integridad del acrosoma y fragmentación de ADN después de la descongelación. Los parámetros cinemáticos, sin embargo, si mostraron valores significativamente más altos en BotuCrio que en los diluyentes a base de lactosa (P En la segunda experiencia enfocamos nuestro trabajo a valorar la calidad espermática del semen congelado de burros (Equus asinus) ya que, actualmente, después de ser descongelado todavía sigue dando pobres resultados, inferiores a la de otros animales, incluidos los caballos. El objetivo de este estudio fue valorar el efecto protector de la adición de calostro de burra en los diluyentes para la congelación de semen asnal. Después de descongelar evaluamos la motilidad de los espermatozoides mediante sistema informático tipo CASA, viabilidad mediante SYBR-14 y yoduro de propidio (PI), integridad funcional de la membrana mediante prueba HOS e integridad del acrosoma por isotiocianato conjugado con aglutinina de maní (FITC-PNA) y PI. Se recogió semen de cinco burros fértiles (dos eyaculados por burro en diferentes días). Las muestras de semen se agruparon, diluyeron y criopreservaron en tres grupos experimentales: BotuCrio®, diluyente de lactosa suplementado con yema de huevo (20%) y diluyente de lactosa suplementado con calostro de burra (20%). Los resultados demostraron que las muestras con calostro de burra fueron significativamente mejores en casi todos los parámetros evaluados (p 0.05). En conclusión, el diluyente a base de calostro de yegua puede usarse con éxito para la criopreservación del semen de burro y podría mejorar eficazmente las cualidades del semen de burro después de la descongelación.El objetivo de la tercera experiencia fue comparar el efecto protector del calostro de yegua y de burra en la preservación espermática en la especie asnal. El calostro se obtuvo de cuatro yeguas y cuatro burras justo después del nacimiento del potro. Los eyaculados fueron recogidos de cinco burros fértiles. Las muestras de semen se agruparon, diluyeron y criopreservaron en tres grupos experimentales de diluyentes: lactosa suplementada con de yema de huevo (20%) como grupo control, lactosa suplementada con calostro de burra (20%) y lactosa suplementada con calostro de yegua (20%). Después de descongelar, evaluamos la motilidad de los espermatozoides y parámetros de velocidad mediante el sistema informático ISAS Proiser®, la viabilidad mediante SYBR-14 y yoduro de propidio (PI), la funcional de membrana mediante la prueba de HOS y la integridad del acrosoma por isotiocianato conjugado con aglutinina de maní (FITC-PNA) y PI. Los resultados obtenidos en las muestras de calostro de burra adicionada a diluyentes para congelación de semen de burro, fueron significativamente superiores (p En la cuarta experiencia se evaluó el uso de crioprotectores no permeables, lactosa y trealosa, en la vitrificación de espermatozoides procedentes tanto de origen epididimario como de eyaculado. Las muestras de semen de eyaculado se recogieron de siete sementales fértiles y las de epidídimo de diez sementales después de su sacrificio en el matadero. Tanto las muestras de eyaculado como las de epidídimo se diluyeron y vitrificaron usando INRA 96® y albúmina de suero bovino, así como trealosa o lactosa. Como control se realizó una congelación por el método convencional con muestras epididimales y de eyaculado. La vitrificación se realizó sumergiendo suspensiones de esperma directamente en N2L, formándose esferas. Después de descongelar (control) y desvitrificar, se evaluó la motilidad de los espermatozoides y parámetros de velocidad mediante análisis computerizado ISAS Proiser®, la viabilidad se evaluó utilizando SYBR-14 y yoduro de propidio (PI) y la integridad del acrosoma mediante fluoresceína utilizando isotiocianato combinado con aglutinina de maní (FITC-PNA) y PI. En las muestras de epidídimo, la desvitrificación del grupo con trealosa (EPT) y la del grupo de lactosa (EPL) tuvo espermatozoides con mejor motilidad progresiva que en la muestra control (EPC). Después de la desvitrificación la motilidad de las muestras de EPT fue superior (P |
| Databáze: | OpenAIRE |
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