Modificación genética de células madre mesenquimales con polímeros activados con hidrazona

Autor: Ramil Bouzas, Alba
Přispěvatelé: Rey-Rico, Ana, Estévez-Pérez, Graciela, Universidade da Coruña. Facultade de Ciencias
Rok vydání: 2022
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Zdroj: RUC. Repositorio da Universidade da Coruña
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Popis: [Resumen]: Las células madre mesenquimales (MSCs) presentan un gran potencial en medicina regenerativa y terapia génica como consecuencia de sus múltiples propiedades, entre las que destacan su capacidad de renovación y diferenciación a distintos linajes mesodérmicos. Dentro de los vectores utilizados en terapia génica, los polímeros activados con hidrazona han sido muy estudiados en los últimos años debido a su gran versatilidad química y reducida citotoxicidad. Estos sistemas son obtenidos mediante la co-funcionalización del polímero con grupos hidrazona (P2) con un aldehído catiónico (T1) necesario para la interacción con el ADN y un aldehído hidrofóbico (T2, T4, T5) responsable de reducir la citotoxicidad y mejorar la solubilidad. Los polímeros resultantes presentan carácter anfipático y capacidad de autoensamblaje. En el presente trabajo se estudiaron diferentes formulaciones de polímero cofuncionalizado como vector no viral para comprobar su capacidad de transferencia génica en una línea celular inmortalizada de MSCs (iMSCs) con un plásmido de ADN que contiene el gen reportero, lacZ (placZ). Los resultados obtenidos sugieren que la formulación estudiada, T1P2T5, mostró una reducida citotoxicidad promoviendo valores detectables de actividad de β-galactosidasa. [Resumo]: As células nai mesenquimais (MSCs) presentan un gran potencial en medicina rexenerativa e terapia xénica como consecuencia das súas múltiples propiedades, entre as que destacan a súa capacidade de renovación e diferenciación aos distintos linaxes mesodérmicos. Dentro dos vectores utilizados en terapia xénica, os polímeros activados con hidrazona foron moi estudados nos últimos anos debido a súa gran versatilidade química e reducida citotoxicidade. Estes sistemas foron obtidos mediante a co-funcionalización do polímero con grupos hidrazona (P2) cun aldehído catiónico (T1) necesario para a interacción co ADN e un aldehído hidrofóbico (T2, T4 e T5) responsable de reducir a citotoxicidade e mellorar a solubilidade. Os polímeros resultantes presentan carácter anfipático e capacidade de autoensamblaxe. No presente traballo foron estudadas diferentes formulacións de polímero cofuncionalizado como vector non viral para comparar a súa capacidade de transferencia xénica nunha liña celular inmortalizada de MSCs (iMSCs) cun plásmido de ADN que contén o xen reporteiro, lacZ (placZ). Os resultados obtidos suxiren que a formulación estudada, T1P2T5, mostrou unha reducida citotoxicidade promovendo valores detectables de actividade β-galactosidasa. [Abstract]: Mesenchymal Stem Cells (MSCs) have a great potential in regenerative medicine and gene therapy due to their multiple properties, including their capacity for renewal and differentiation into different mesodermal lineages. Among the vectors used in gene therapy, hydrazone-activated polymers have been extensively studied in recent years. The reason for this remains in their great chemical versatility and reduced cytotoxicity. These systems are obtained by co-functionalizing the polymer with hydrazone groups (P2) with a cationic aldehyde (T1) necessary for interacting with DNA and a hydrophobic aldehyde (T2, T4, T5) responsible for reducing cytotoxicity an improving solubility. The resulting polymers show amphipathic character and self-assembly capacity. In the present study, different formulations of co-functionalized polymers were tested as non-viral vectors by evaluating their gene transference capacity in an immortalized MSCs line (iMSCs) with a DNA plasmid containing the reporter gene, lacZ (placZ). The results obtained suggest that the formulation studied, T1P2T5, showed reduced cytotoxicity promoting detectable β-galactosidase activity values. Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2021/2022
Databáze: OpenAIRE
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