Expresión del regulador epigenético p38IP/FAM48A en la retina de ratón e identificación de proteínas con las que interacciona en el núcleo de fotorreceptores 661W

Autor: Haro, Carmen, Uribe, Mary Luz, Cruces, Jesús, Nieto, José Martín
Přispěvatelé: Instituto de Salud Carlos III
Rok vydání: 2015
Zdroj: Digital.CSIC. Repositorio Institucional del CSIC
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Popis: Resumen del trabajo presentado al XXXXVIII Congreso de la Sociedad Española de Bioquímica y Biología Molecular (SEBBM), celebrado en Valencia del 7 al 10 de septiembre de 2015.
Mutaciones en los genes POMT1 y POMT2, que codifican las subunidades de un heterodímero con actividad proteína O-manosiltransferasa, causan el síndrome de Walker-Warburg, la enfermedad de músculo-ojo-cerebro y otras distrofi as neuromusculares denominadas distroglicanopatías que afectan gravemente a la retina. Mediante el sistema del doble híbrido hemos encontrado que estas dos proteínas interactúan por separado con p38IP/FAM48A, un factor de transcripción con un papel regulador a nivel epigenético del desarrollo ocular y del SNC. Además, hemos observado mediante inmunocitoquímica de fl uorescencia que las tres proteínas se colocalizan en las regiones eucromáticas del núcleo en fotorreceptores de ratón de la línea 661W. En este trabajo hemos abordado el estudio de la expresión y localización del factor de transcripción p38IP/FAM48A en la retina de ratón adulto. Mediante Western blotting hemos detectado que este regulador está presente en extractos de retina de ratón, distribuyéndose exclusivamente en la fracción nuclear. También hemos determinado mediante inmunohistoquímica de fl uorescencia que p38IP/FAM48A está ampliamente distribuido en la retina de ratón, concentrándose en el núcleo de células ganglionares y apareciendo excluido de las capas plexiformes. Hemos observado que este factor de transcripción también se localiza en los núcleos de los conos, en concordancia con su distribución en fotorreceptores 661W, así como de determinadas células de la capa nuclear interna. Mediante ensayos de coinmunoprecipitación del factor p38IP/FAM48A a partir de extractos nucleares de células 661W hemos detectado diferentes proteínas, algunas de ellas con una masa molecular aparente que se corresponde con la de POMT1 y POMT2, y que están siendo analizadas mediante cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS). Los resultados obtenidos permitirán inferir conclusiones sobre la posible interrelación de p38IP/FAM48A con el heterodímero POMT1/2 y su función en la retina de mamíferos.
Financiación: Instituto de Salud Carlos III, proyecto PI12/00157.
Databáze: OpenAIRE
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