| Popis: |
Citostatici korišteni u ovom radu (abemaciklib, ribociklib, palbociklib, anastrozol, letrozol i fulvestrant) imaju značajnu ulogu u liječenju raka dojke. Nikad se ne primjenjuje svih šest citostatika istovremeno već se primjenjuju u kombinaciji kao npr. fulvestrant s palbociklibom jer je takvim korištenjem u kliničkim ispitivanjima dokazana veća stopa preživljenja. S obzirom da postoji varijabilnost odgovora na terapiju od pacijenta do pacijenta, terapijsko praćenje navedenih citostatika moglo bi uvelike poboljšati ishode terapije uz smanjenje rizika pojave nuspojava ili toksičnih učinaka. Za uspješno terapijsko praćenje lijekova vrlo je važno postojanje bioanalitičke metode koja uključuje i pripremu uzorka. Priprema uzorka, kao što je ekstrakcija čvrstom fazom (SPE), neophodan je korak za osiguravanje odgovarajuće osjetljivosti, selektivnosti i ponovljivosti metode za određivanje analita od interesa u biološkim uzorcima jer se analit u biološkim uzorcima nalazi u malim koncentracijama od ng/mL pa čak i do pg/mL. U ovom su radu u svrhu razvoja metode ekstrakcije čvrstom fazom korišteni komercijalno dostupni sorbensi pri čemu se za svaku vrstu sorbensa ispitala najbolja kombinacija otapala te utjecaj različitih načina pripreme uzorka krvne plazme. Učinkovitost ekstrakcije kvantitativno je određena tekućinskom kromatografijom ultra visoke djelotvornosti uz spektrometar masa kao detektor. Najbolja iskorištenja za sve citostatike ostvarena su na C8 koloni iza čega slijedi postupak na Oasis HLB koloni. Na temelju dobivenih rezultata preliminarnog ispitivanja na komercijalno dostupnim sorbensima pristupilo se ciljanoj pripremi polimernog sorbensa s otiskom molekule fulvestranta jer su za njega dobivena najlošija iskorištenja ekstrakcije. Pritom se primijenio postupak korišten na Oasis HLB koloni (eluiranje s 2 %-tnom mravljom kiselinom u metanolu nakon čega slijedi čisti metanol) jer se primijetilo da kod tog postupka postoji prostor za napredak vezano uz iskorištenje fulvestranta (74, 96%). Sorbens pripremljen s funkcionalnim monomerom 2- hidroksietil metakrilatom (HEMA) pokazao se najpovoljnijim za ekstrakciju fulvestranta. Ispitano je i korištenje serijski vezanih sorbensa MIP-HEMA-Oasis HLB gdje su bolja iskorištenja dobivena u slučaju gdje se polimerni sorbens MIP- HEMA nalazi iznad Oasis HLB sorbensa. Oba pripremljena sorbensa, MIP-HEMA i MIP-HEMA serijski vezan s komercijalnim sorbensom, su dobri specifični sorbensi za izolaciju fulvestranta iz uzorka krvne plazme. |
