Interlaboratory evaluation of Mucorales PCR assays for testing serum specimens: A study by the fungal PCR Initiative and the Modimucor study group

Autor: Rocchi, S, Scherer, E, Mengoli, C, Alanio, A, Botterel, F, Bougnoux, M, Bretagne, S, Cogliati, M, Cornu, M, Dalle, Frédéric, Damiani, Céline, Denis, J, Fuchs, S, Gits-Muselli, M, Hagen, F, Halliday, C, Hare, R, Iriart, Xavier, Klaassen, C, Lackner, M, Lengerova, M, Letscher-Bru, V, Morio, F, Nourrisson, C, Posch, W, Sendid, B, Springer, J, Willinger, B, White, P, Barnes, R, Cruciani, M, Donnelly, J, Loeffler, J, Millon, L
Přispěvatelé: Service de parasitologie et mycologie [CHRU de Besançon], Centre Hospitalier Régional Universitaire de Besançon (CHRU Besançon), Laboratoire Chrono-environnement (UMR 6249) (LCE), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université de Franche-Comté (UFC), Université Bourgogne Franche-Comté [COMUE] (UBFC)-Université Bourgogne Franche-Comté [COMUE] (UBFC), Università degli Studi di Padova = University of Padua (Unipd), Centre National de Référence Mycoses Invasives et Antifongiques - National Reference Center Invasive Mycoses & Antifungals (CNRMA), Institut Pasteur [Paris] (IP), Mycologie moléculaire - Molecular Mycology, Institut Pasteur [Paris] (IP)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université Paris Cité (UPCité), Hôpitaux Universitaire Saint-Louis, Lariboisière, Fernand-Widal, Université Paris Cité (UPCité), Université Paris-Est Créteil Val-de-Marne - Faculté de médecine (UPEC Médecine), Université Paris-Est Créteil Val-de-Marne - Paris 12 (UPEC UP12), École nationale vétérinaire - Alfort (ENVA), CHU Henri Mondor [Créteil], CHU Necker - Enfants Malades [AP-HP], Assistance publique - Hôpitaux de Paris (AP-HP) (AP-HP), Biologie et Pathogénicité fongiques (BPF), Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Institut Pasteur [Paris] (IP), Università degli Studi di Milano = University of Milan (UNIMI), Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 (UGSF), Université de Lille-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Laboratoire de parasitologie mycologie (CHU de Dijon), Centre Hospitalier Universitaire de Dijon - Hôpital François Mitterrand (CHU Dijon), Vin Aliment Microbiologie et Stress (VAlMiS), Procédés Alimentaires et Microbiologiques (PAM), Université de Bourgogne (UB)-AgroSup Dijon - Institut National Supérieur des Sciences Agronomiques, de l'Alimentation et de l'Environnement-Université de Bourgogne (UB)-AgroSup Dijon - Institut National Supérieur des Sciences Agronomiques, de l'Alimentation et de l'Environnement-Procédés Alimentaires et Microbiologiques [Dijon] (PAM), Université de Bourgogne (UB)-AgroSup Dijon - Institut National Supérieur des Sciences Agronomiques, de l'Alimentation et de l'Environnement-Université Bourgogne Franche-Comté [COMUE] (UBFC)-AgroSup Dijon - Institut National Supérieur des Sciences Agronomiques, de l'Alimentation et de l'Environnement-Université Bourgogne Franche-Comté [COMUE] (UBFC), Laboratoire de parasitologie et de mycologie médicales [CHU Amiens], CHU Amiens-Picardie, Agents infectieux, résistance et chimiothérapie - UR UPJV 4294 (AGIR ), Université de Picardie Jules Verne (UPJV)-CHU Amiens-Picardie, Laboratoire de Parasitologie et de Mycologie Médicale [Strasbourg], Les Hôpitaux Universitaires de Strasbourg (HUS), Leopold Franzens Universität Innsbruck - University of Innsbruck, UFR Médecine [Santé] - Université Paris Cité (UFR Médecine UPCité), Univ Utrecht, Westerdijk Fungal Biodivers Inst, Fungal Physiol, Uppsalalaan 8, NL-3584 CT Utrecht, Netherlands, Partenaires INRAE, University Medical Center [Utrecht], Shanghai Key Laboratory of Molecular Medical Mycology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Statens Serum Institut [Copenhagen], Service de Parasitologie et Mycologie [CHU Toulouse], Institut Fédératif de Biologie (IFB), Centre Hospitalier Universitaire de Toulouse (CHU Toulouse)-Centre Hospitalier Universitaire de Toulouse (CHU Toulouse)-Pôle Biologie [CHU Toulouse], Centre Hospitalier Universitaire de Toulouse (CHU Toulouse), Centre de Physiopathologie Toulouse Purpan (CPTP), Université Toulouse III - Paul Sabatier (UT3), Université de Toulouse (UT)-Université de Toulouse (UT)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Erasmus University Medical Center [Rotterdam] (Erasmus MC), Innsbruck Medical University = Medizinische Universität Innsbruck (IMU), University Hospital Brno, CHU Strasbourg, Centre hospitalier universitaire de Nantes (CHU Nantes), CHU Clermont-Ferrand, University Hospital Wuerzburg / Universitäts­klinikum Würzburg, Medizinische Universität Wien = Medical University of Vienna, Public Health Wales [Cardiff, Royaume uni], University of Texas Health Science Center at San Antonio [San Antonio, Tx, USA], This work was supported by a grant from the French Ministry of Health PHRC (Projet Hospitalier de Recherche Clinique) national-ModiMucor 2014-A00580-47., Laboratoire Chrono-environnement - CNRS - UBFC (UMR 6249) (LCE), Génomique évolutive, modélisation et santé (CNRS-UMR2000), Institut Pasteur [Paris]-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université Paris Cité (UPCité), Université Paris Cité - UFR Médecine [Santé] (UPCité UFR Médecine), CHU Henri Mondor, Biologie des ARN des Pathogènes fongiques - RNA Biology of Fungal Pathogens, Institut Pasteur [Paris]-Université Paris Cité (UPCité), University of Innsbruck, Service de Parasitologie et Mycologie, CHU Toulouse [Toulouse]-Institut Fédératif de Biologie (IFB) - Hôpital Purpan, Université Fédérale Toulouse Midi-Pyrénées-Université Fédérale Toulouse Midi-Pyrénées-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Biologie et Pathogénicité fongiques - Fungal Biology and Pathogenicity (BPF), Institut Pasteur [Paris]-Université Paris Cité (UPCité)-Institut National de Recherche pour l’Agriculture, l’Alimentation et l’Environnement (INRAE), University of Padova Medical School, Institut Pasteur [Paris]-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université Paris Cité (UPC), Université Paris Cité - UFR Médecine Paris Centre [Santé] (UPC Médecine Paris Centre), Université Paris Cité (UPC), Institut Pasteur [Paris]-Université Paris Cité (UPC), Università degli Studi di Milano [Milano] (UNIMI)
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2021
Předmět:
Zdroj: Medical Mycology
Medical Mycology, 2021, 59 (2), pp.126-138. ⟨10.1093/mmy/myaa036⟩
Medical Mycology, Oxford University Press, 2021, 59 (2), pp.126-138. ⟨10.1093/mmy/myaa036⟩
ISSN: 1369-3786
1365-280X
DOI: 10.1093/mmy/myaa036⟩
Popis: International audience; Interlaboratory evaluations of Mucorales qPCR assays were developed to assess the reproducibility and performance of methods currently used. The participants comprised 12 laboratories from French university hospitals (nine of them participating in the Modimucor study) and 11 laboratories participating in the Fungal PCR Initiative. For panel 1, three sera were each spiked with DNA from three different species (Rhizomucor pusillus, Lichtheimia corymbifera, Rhizopus oryzae). For panel 2, six sera with three concentrations of R. pusillus and L. corymbifera (1, 10, and 100 genomes/ml) were prepared. Each panel included a blind negative-control serum. A form was distributed with each panel to collect results and required technical information, including DNA extraction method, sample volume used, DNA elution volume, qPCR method, qPCR template input volume, qPCR total reaction volume, qPCR platform, and qPCR reagents used. For panel 1, assessing 18 different protocols, qualitative results (positive or negative) were correct in 97% of cases (70/72). A very low interlaboratory variability in Cq values (SD = 1.89 cycles) were observed. For panel 2 assessing 26 different protocols, the detection rates were high (77-100%) for 5/6 of spiked serum. There was a significant association between the qPCR platform and performance. However, certain technical steps and optimal combinations of factors may also impact performance. The good reproducibility and performance demonstrated in this study support the use of Mucorales qPCR as part of the diagnostic strategy for mucormycosis.
Databáze: OpenAIRE
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