Kanserli hücre hatları, pasaj sayısı arttıkça genomik organizasyonunu ve karyotipini değiştirir: sitogenetik bir çalışma

Autor: YILMAZ, M. Bertan, TUNÇ, Erdal, ILGAZ, N. Seda, ÖKSÜZ, Hale, ÖZTECİK, Ezgi, ÖZPAK, Lütfiye, ÖCAL, İşıl, PAZARBAŞI, Ayfer, DEMİRHAN, Osman
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2018
Předmět:
Zdroj: Cukurova Medical Journal, Vol 43, Iss 4, Pp 923-930 (2018)
Volume: 43, Issue: 4 923-930
Cukurova Medical Journal
ISSN: 2602-3040
2602-3032
Popis: Amaç: İnsan sağlığına ilişkin bilimsel araştırmalardamemelilerin sınırlı kullanımı yeni araştırma stratejilerinin geliştirilmesineyol açmıştır. Bunlardan birisi memeli hücre kültürü tekniğidir. Piyasadabulunan, sitogenetik ve biyokimyasal belirteçlerle iyi karakterize edilmişkanser hücre hatları farklı laboratuvarlar arasındaki sonuçlarınkarşılaştırılmasına olanak sağlar. Bununla birlikte, bu hücre dizileri,kültürde uzun bir süre muhafaza edildiklerinden, önceki pasajlarda tanımlanmışveya saptanmamış, hücre hatlarının özelliklerini ve ajanlara karşı tepkilerinideğiştirebilecek mutasyonlar meydana gelebilir. Burada sitogenetik olarak, altıfarklı hücre hattının tekrarlanan hücre kültürlerinde yeni kromozomaldüzenlenmeleri araştırdık.Metod: MCF7, HCT116, A549, SHSY5Y, HEPG2 ve NIH3T3 hücrehatları, %10 FBS ve %1 penisilin-streptomisin içeren DMEM besiyerinde kültüreedildi. Metafaz kromozomlarının analizi için GTG bantlama prosedürü kullanıldıve en az 20 metafaz analiz edildi.Bulgular: İncelenen hücre kültürlerinde pasaj sayısıartışıyla kromozom sayı varyasyonları ve yapısal değişiklikler tespit ettik.Sonuç: İlaçları test etmek, moleküler mekanizmalarıtanımlamak, çevresel etkileri anlamak için hücre hatları uzun sürediraraştırmalarda kullanılmaktadır. Bir hücre dizisinin en önemli özelliği, konakorganizmasıyla olan genotip ve karyotip benzerlikleridir. Kanser Hücresisoyları, genomik/kromozomal dengesizliğe sahiptir ve bu da her pasajda fenotipdeğişimi ile birlikte karyotip değişimine neden olabilmaktedir. Bu nedenle, hücrekültürlerinin kullanılacağı bir araştırma projesine başlamadan muhakkakkullanılan hücre hattının karyotipini doğrulamak gerekmektedir.
Purpose: The limited use of mammals in human health relatedscientific research has led to the development of new research strategies likecell culture techniques. Commercially available cancerous cell lines thatare well characterized by cytogenetics and biochemical markers allow comparisonof results among different laboratories. However, as these cell lines tend tobe maintained in culture over long periods of time, mutations can occur thatmay change characteristics and responses of cell lines that have initially beenidentified or non-existed at earlier passages. Here we cytogeneticallyinvestigated the chromosomal rearrangements in repeated cultures of sixdifferent cell lines over continuous passages.Method: MCF7, HCT116,A549, SHSY5Y, HEPG2, and NIH3T3 cell lines were cultured in DMEM containing 10%FBS and 1% penicillin-streptomycin. GTGbanding procedure was used for the analysis of metaphase chromosomes, at least20 metaphases were analyzed per cell line.Results: We found chromosomenumber variations and structural changes in the all examined cell cultures asthe passage numbers increase.Conclusion: Celllines have long been used in research to test drugs, to delineate molecularmechanisms, to understand the environmental effects and so on. The mostimportant feature of a cell line is its genotype and karyotype similaritieswith their host organism. Cancer Cell lines, possess genomic/chromosomal instability that also lead them to changetheir phenotype along with their karyotype from one passage to next. Therefore,it is always best to verify karyotype before employing a specific cell line ina research project.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: