Evaluation of the antioxidant effect of Resveratrol on the cryotolerance of bovine embryos of the Hartón del Valle breed produced in vitro

Autor: Escobar Escobar, Juan Camilo
Přispěvatelé: Torres Osorio, Viviana, Campos Gaona, Rómulo, Maturana Mena, Diana Milena, Conservación, mejoramiento y utilización del ganado criollo Hartón del Valle y otros recursos genéticos animales en el suroccidente colombiano
Jazyk: Spanish; Castilian
Rok vydání: 2021
Předmět:
Zdroj: Repositorio UN
Universidad Nacional de Colombia
instacron:Universidad Nacional de Colombia
Popis: Ilustraciones, fotografías, tablas La raza Hartón del Valle pertenece al conjunto de razas bovinas criollas colombianas adaptadas a las condiciones del trópico, la cual, ha sido sometida a constantes cruzamientos con razas introducidas, reduciendo la población pura y ubicándola en la categoría de “vulnerable”, es decir, que se está enfrentando a un riesgo de extinción alto. En consecuencia, se buscan alternativas para conservar el material genético de la raza. La criopreservación de embriones se ha convertido en un método altamente utilizado en embriones comerciales, debido a la similitud de supervivencia entre los embriones es frescos y los criopreservados (Shaw et al., 2000). La cualidad más relevante de la criopreservación de embriones, es lograr el almacenamiento en condiciones de bajas temperaturas (-196ºC), tratando de mantener la integridad general del embrión (Rodríguez & Jiménez, 2011). Para lograr esto, es necesario eliminar las dos causas principales de muerte celular asociada con la criopreservación, esto es, la formación de cristales de hielo y las concentraciones letales de solutos, mientras se mantiene la integridad de los orgánulos intracelulares (Edgar & Gook, 2012). La vitrificación es un método ideal para criopreservar oocitos y embriones de mamíferos, debido a las altas tasas de enfriamiento y, el corto tiempo de exposición de las células embrionarias a temperaturas críticas y a los crioprotectores, factores que minimizan los efectos tóxicos y el daño a la membrana de las células embrionarias. Lo anterior, perfila la técnica de vitrificación como una alternativa para criopreservar la variabilidad del material genético bovino, sin embargo, se conoce que tiene algunos efectos nocivos sobre la calidad de los embriones. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la suplementación del Resveratrol en los medios de cultivo in vitro (CIV) y de atemperado, sobre el desarrollo embrionario, criotolerancia y estado oxidativo de embriones producidos in vitro. Se realizó un primer estudio utilizando oocitos obtenidos de una planta de faenado, se maduraron y fertilizaron in vitro mediante un proceso estandarizado. Los presuntos cigotos se cultivaron en medio SOF suplementado con 0.5 μM de Resveratrol (CR) y sin Resveratrol (C-). El día 7 post fertilización, se evaluaron las tasas de blastocistos y se vitrificaron usando el método de mínimo volumen. Posteriormente, ambos grupos fueron atemperados con Resveratrol 0.5 μM. (C-VR,CRVR) y sin Resveratrol (C-V-: control, CRV-) y fueron cultivados 48 horas para evaluarlas tasas de reexpansión y eclosión. Finalmente, los embriones se sometieron a una doble tinción para medir los niveles de ROS y contenido de GSH intracelular utilizando la sonda 2,7- Diclorodihidrofluoresceina diacetato (H2DCFDA; Invitrogen®) y la sonda 4-clorometil-6,8-difluoro-7-hidroxicumarina (Cell Tracker Blue; CMF2HC; Invitrogen®) respectivamente. El contenido de GSH fue significativamente más alto (p
Databáze: OpenAIRE