Sinteza fragmenata DNA za inaktivaciju gena RAD27 lančanom reakcijom polimerazom

Autor:	Nestić, Davor
Jazyk:	chorvatština
Rok vydání:	2013
Předmět:	Saccharomyces cerevisiae lančana reakcija polimerazom homologna rekombinacija zamjena gena
Popis:	Cilj ovoga rada je umnaţanje linearnog fragmenta DNA rad27::kanMX4 lančanom reakcijom polimerazom iz kvasca Saccharomyces cerevisiae. Fragment rad27::kanMX4 se zahvaljujući krajevima homolognima dijelu gena RAD27 i selektivnom biljegu kanMX4 moţe koristiti za inaktivaciju gena RAD27 u drugim sojevima kvasca mehanizmom rekombinacije „end-out“ (zamjena gena). Nakon izolacije genomske DNA kvasca, provedena je gel- elektroforeza radi provjere uspješnosti izolacije te je izolirana DNA posluţila kao kalup za sintezu fragmenta lančanom reakcijom polimerazom. Gel- elektroforezom provjerena je uspješnost sinteze fragmenta, a struktura umnoţenog fragmenta provjerena je restrikcijskom analizom pomoću tri restrikcijska enzima. Veličina dobivenih fragmenata nakon cijepanja restrikcijskim enzimima bila je u skladu s restrikcijskom mapom fragmenta rad27::kanMX4.
Databáze:	OpenAIRE
Externí odkaz:	https://explore.openaire.eu/search/publication?articleId=57a035e5b1ae::f8ceaf02e28ee09f80f4169906be95e4 https://www.bib.irb.hr/662829 Zobrazit plný text záznamu