| Popis: |
Aujeszkyjeva bolest (AB) je svinjska enzooza prisutna u mnogim dijelovima svijeta i jedna od najznačajnijih bolesti u svinjogojstvu danas. Tu bolest uzrukuje svinjski herpesvirus iz porodice Herpesviridae, potporodice Alphaherpesviriniae, rod Varicellovirus. Taj je virus poznat i pod nazivom pseudorabies virus i kao virus Aujeszkyjeve bolesti (VAB). Prvenstveno je neurotropan i patogen za velik broj domaćih i divljih životinjskih vrsta, a svinje su primarni domaćin i izvor uzročnika. Virus inficira središnji živčani sustav, respiratorne organe i izaziva poteškoće pri reprodukciji. U svrhu smanjivanja ekonomskih gubitaka i iskorjenjivanja AB, svinje se danas cijepe živim, atenuiranim cjepivima kojima nedostaje gE protein. Cilj rada je bio pronaći bolji model za određivanje imunogenosti cjepiva od dosadašnjeg na svinjama, koji je zahtjevan i skup. Stoga su u radu korišteni štakori soja Fischer kao modelni organizam za ispitivanje učinkovitosti cjepiva DAVAK gE^- nakon inficiranja s tri različito patogena soja VAB: B-KAL/68, Bartha K/61 i NIA-3. Suspenzija virusnog soja B-KAL/68, titra 10^3 TCID_50 nije izazvala uginuća u neimuniziranih životinja. Bartha K/61 i NIA-3 izazivaju uginuća u neimuniziranih štakora. Postotak i dinamika uginuća ovise o titru suspenzije virusa. Titar soja NIA-3 od 10^6.8 i 10^7 TCID_50 usmrćuje 100% inficiranih životinja u vremenu od 48 sati, dok se kod soja Bartha K/61 titra 10^6 vrijeme produžuje do 190 sati, a smrtnost smanjuje na oko 60-80%. Jednokratnim cijepljenjem u oba slučaja postignut je određeni stupanj zaštite, a najbolji rezultati postignuti su nerazrijeđenim cjepivom. Jedna doza cjepiva u slučaju NIA-3 sadrži više od 19.50 PD_50, a za soj Bartha K/61 više od 16.00 PD_50. Metodom direktne imunofluorescencije dokazana je prisutnost čestica virusa u tkivu mozga uginulih štakora. Metodom imunodifuzije u gelu, u serumima preživjelih tretiranih životinja dokazana je serološka reakcija. Najveće vrijednosti ID-titra postignute su u serumima cijepljenih i inficiranih štakora. ID-titri seruma životinja inficiranih sojevima NIA-3 i Bartha K/61 se signifikantno ne razlikuju. Elektroforezom i metodom imunoblotinga uspoređivani su proteini cjelovite virusne čestice s proteinima iz seruma tretiranih štakora. Postojanje kompatibilnih vrpci na nitrocelulozi dokazuje prisutnost specifičnih glikoproteina u serumu odgovornih za imuni odgovor koji je najizraženiji u cijepljenih i inficiranih životinja, dok u negativnoj kontroli nema reakcije. Dokazano je da štakori mogu biti model životinje za procjenjivanje učinkovitosti cjepiva protiv AB, a najpogodnijim virusnim sojem pokazao se soj Bartha K/61, koji je apatogen za svinje, te je tako omogućen uzgoj svinja bez pogubne zaraze virusom VBA. |
