Analiza razine ekspresije proteina GAPDH, Akt i p53 u stanicama izloženim N-sulfonilureama metodom Western blot

Autor: Kirchofer, Juraj
Jazyk: chorvatština
Rok vydání: 2017
Předmět:
Popis: Uvod: Tumorske bolesti, kao vodeći uzrok smrtnosti u svijetu, nameću potrebu za pronalaskom učinkovite antitumorske terapije. Većina antitumorskih lijekova nije ciljno specifična te napadaju i zdrave stanice. Novosintetizirani spojevi N-sulfoniluree koji su korišteni u ovom istraživanju pripadaju grupi antimetabolita koji postižu ciljnu specifičnost kroz interakciju s prirodnim metabolitima. Cilj istraživanja bio je odrediti moguće promjene ekspresije p53, Akt i GAPDH proteina u staničnim kulturama HeLa, CaCo-2, NCI-H358, K562 i Raji nakon tretmana spojevima D7-23 i R-191 N-sulfoniluree, ali i usporediti rezultate ekspresije proteina kod tretiranih i ne tretiranih stanica (kontrolna točka). Materijali i metode: Nakon 24-satnog tretmana, stanice su lizirane, a stanični proteini izolirani. Prisustvo analiziranih proteina p53, Akt i GAPDH određeno je Western blot metodom uz korištenje p53, Akt i GAPDH protutijela. Relativna kvantifikacija proteina na membrani napravljena je uz pomoć ImageJ programa. Rezultati Western blot analize su pokazali promjene u ekspresiji p53, Akt i GAPDH proteina prije i nakon tretmana komponentama D7-23 i R-191 N-sulfonilurea. Značajna promjena u ekspresiji nakon tretmana s D7-23 i R-191 je prisutna kod proteina Akt u HeLa staničnoj liniji. Zaključak: Na temelju dobivenih rezultata možemo zaključiti da su testne komponente pokazale potencijalno antitumorsko djelovanje na Akt signalni put u HeLa staničnoj liniji
Databáze: OpenAIRE