| Popis: |
Izvanstanični protein toplinskog šoka 70 (Hsp70) djeluje kao molekularni obrazac oštećenja i može uzrokovati upalni odgovor. Cilj rada bio je ispitati djelovanje različitih koncentracija izvanstaničnog Hsp70 te lipopolisaharida (LPS) i lipoteikoične kiseline (LTA) na procese upale i programirane stanične smrti (apoptoze). Prisutnost upale i aktivacije inflamasoma ispitani su luminometrijskim mjerenjem aktivnosti kaspaze-1, a apoptoze luminometrijskim mjerenjem aktivnosti kaspaza-3/7, -8 i -9, u THP-1 stanicama i monocitima iz periferne krvi zdravih donora. THP-1 stanice i monociti su tretirani rekombinantnim humanim (rh) Hsp70 proteinom u koncentracijama od 0, 3, 1, 3 i 10 μg/mL, s 0, 1 μg/mL LPS-a te 1 μg/mL LTA tijekom 2, 4, 6 i 8 sati. Rezultati su pokazali da tretiranje LPS-om i LTA u THP-1 stanicama uzrokuje aktivaciju kaspaze-1. LPS uzrokuje i aktivaciju kaspaza-3/7 te kaspaze-8 u THP-1 stanicama. Kod monocita, LPS i LTA uzrokuju smanjenje aktivnosti kaspaze-1, a LTA uzrokuje i smanjenje aktivnosti kaspaze-9. rhHsp70 primijenjen u nižim koncentracijama i nakon kraćeg vremena inkubacije potiskuje aktivnost kaspaze-1 u THP-1 stanicama, a pri višim koncentracijama i nakon duljeg vremena inkubacije stimulira njenu aktivnost. Nakon 8 sati rhHsp70 uzrokuje i smanjenje aktivnosti kaspaza-3/7 u ovim stanicama. Kod monocita, tretiranje s rhHsp70 potiče aktivnosti kaspaze-1, dok visoke koncentracije rhHsp70 snižavaju aktivnost kaspaze-9. Zaključno, LPS i LTA uzrokuju aktivaciju inflamasoma, a LPS aktivira i apoptozne kaspaze-3/7 i -8 u THP-1 stanicama, dok LPS i LTA ne uzrokuju aktivaciju inflamasoma i apoptozu u monocitima. rhHsp70 djeluje protu-upalno u nižim koncentracijama, a u višim koncentracijama uzrokuje aktivaciju inflamasoma u THP-1 stanicama, dok na monocite djeluje upalno i protu-apoptozno. |
