| Popis: |
Nakupljanje agregata tau proteina u neurofibrilarne snopiće najkarakterističnije je histopatološko obilježje Alzheimerove bolesti. U zdravim neuronima tau ima karakteristike topljivog proteina te je uglavnom vezan za mikrotubule aksona, dok u neuronima i glija stanicama zahvaćenim patološkim neurofibrilarnim promjenama tvori agregate i akumulira se u somi i dendritima te jezgrinim porama. Količina agregata i širenje neurofibrilarnih promjena u mozgu u izravnoj su korelaciji s napredovanjem bolesti i stupnjem kognitivnog oštećenja. Glavni rizični čimbenik za nastanak Alzheimerove bolesti je starenje, no točni uzroci agregacije tau proteina nisu razjašnjeni. Budući da su putevi agregacije proteina evolucijski konzervirani, radi genetičkog pristupa otkrivanju čimbenika agregacije i toksičnosti tau proteina , u ovom smo istraživanju kao stanični model odabrali kvasac Saccharomyces cerevisiae. Kako bismo bolje razumjeli mehanizme putem kojih dolazi do ranih patoloških promjena, uspostavili smo i upotrijebili molekularni alat za proučavanje oligomerizacije tau proteina u živim stanicama. Taj se alat temelji na luminiscenciji, gdje interakcija dviju molekula tau proteina rezultira komplementacijom luciferaze NanoLuc i luminiscencijom. Istražili smo dovode li različiti čimbenici, napose proteotoksični stres, do agregacije taua te ispitali toksičnost tau proteina u stanicama kvasca u uvjetima stresa. Pokazali smo da proteotoksični stres ne doprinosi oligomerizaciji i toksičnosti tau proteina eksprimiranog u stanicama kvasca. Uspostavljeni reporter Tau-NanoBiT omogućit će genetički probir čimbenika agregacije i toksičnosti tau proteina u daljnjim istraživanjima. |
