| Popis: |
Cilj ovog diplomskog rada bio je ispitati proteolitičku aktivnost odabranih vrsta bakterija mliječne kiseline (BMK), s posebnim naglaskom na probiotički soj Lactobacillus helveticus M92. Za proteolitičku aktivnost odgovorne su proteinaze stanične stijenke BMK koje im omogućuju rast u mlijeku, sudjeluju u formiranju arome i teksture proizvoda, te u sintezi biološki aktivnih peptida. Metodom difuzije u agar uz dodatak obranog mlijeka, najveću proteolitičku aktivnost pokazale su bakterije L. helveticus M92, L. acidophilus ATCC 4365 i L. rhamnosus GG. Prema dobivenim rezultatima bakterijske kulture pokazuju veću proteolitičku aktivnost od supernatanata kultura. Metodom SDS-PAGE ispitana je prisutnost biološki aktivnih peptida koji nastaju hidrolizom kazeina djelovanjem BMK, i to nakon inkubacije bakterija u MRS tekućoj hranjivoj podlozi uz dodatak kazeina ili nakon inkubacije u obranom mlijeku. Amplifikacijom gena koji kodiraju za proteaze prtH i prtH2 pomoću PCR metode dobiven je signal koji upućuju na prisutnost ovih gena kod L. helveticus M92. |
