Immunized mice naturally process in silico-derived peptides from the nucleocapsid of SARS-CoV-2.

Autor: Campos-Ruíz MA; Laboratorio de Inmunobiología y Diagnóstico Molecular, Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero, Chilpancingo de los Bravo, Guerrero, México., Illades-Aguiar B; Laboratorio de Biomedicina Molecular, Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero, Chilpancingo de los Bravo, Guerrero, México., Del Moral-Hernández O; Laboratorio de Virología, Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero, Chilpancingo de los Bravo, Guerrero, México., Romo-Castillo M; Laboratorio de Investigación en COVID-19, Laboratorio de Investigación en Inmunología y Proteómica, Hospital Infantil de México Federico Gómez, Ciudad de México, México.; Programa Investigadoras e Investigadores por México, Consejo Nacional de Humanidades, Ciencias y Tecnologías, Ciudad de México, México., Salazar-García M; Laboratorio de Biología del Desarrollo y Teratogénesis Experimental, Hospital Infantil de México Federico Gómez, Ciudad de México, México., Espinoza-Rojo M; Laboratorio de Inmunobiología y Diagnóstico Molecular, Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero, Chilpancingo de los Bravo, Guerrero, México., Vences-Velázquez A; Laboratorio de Inmunobiología y Diagnóstico Molecular, Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero, Chilpancingo de los Bravo, Guerrero, México., Cortés-Sarabia K; Laboratorio de Inmunobiología y Diagnóstico Molecular, Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero, Chilpancingo de los Bravo, Guerrero, México. kcortes_sarabia@hotmail.com., Luna-Pineda VM; Laboratorio de Investigación en COVID-19, Laboratorio de Investigación en Inmunología y Proteómica, Hospital Infantil de México Federico Gómez, Ciudad de México, México. luna.pineda@hotmail.com.
Jazyk: angličtina
Zdroj: BMC microbiology [BMC Microbiol] 2023 Oct 28; Vol. 23 (1), pp. 319. Date of Electronic Publication: 2023 Oct 28.
DOI: 10.1186/s12866-023-03076-5
Abstrakt: Background: The nucleocapsid (N) protein of severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 (SARS-CoV-2) is an excellent immunogen that promotes the production of high-titer antibodies. N protein-derived peptides identified using a bioinformatics approach can potentially be used to develop a new generation of vaccines or diagnostic methods for detecting SARS-CoV-2 and its variants. However, further studies must demonstrate their capacity to be naturally processed by the immune system.
Objective: We aimed to examine the in vivo processing and recognition of in silico-identified peptides using the serum of immunized animals with the complete protein.
Methods: Recombinant N (Nrec) protein was subcutaneously administered to six Balb/c mice. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), western blotting, dot blotting, and immunoprecipitation were performed to evaluate the recognition of the complete protein and in silico-derived peptides.
Results: The serum of immunized mice recognized ~ 62.5 ng/µL of Nrec with high specificity to linear and conformational epitopes. Dot blot analysis showed that peptides Npep2 and Npep3 were the most reactive.
Conclusion: Our data confirm the high immunogenicity of the SARS-CoV-2 N protein and provide evidence on the antigenicity of two peptides located in the N-arm/RNA-binding domain (Npep2) and oligomerization domain/C-tail (Npep3), considered the biologically active site of the N protein.
(© 2023. The Author(s).)
Databáze: MEDLINE
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