Membrane Protein Production in Escherichia coli: Protocols and Rules.

Autor:	Royes J; Laboratoire de Colloïdes et Matériaux Divisés École Supérieure de Physique et de Chimie Industrielles de la Ville de Paris 10, Paris, France., Talbot P; Université Paris Cité, CNRS, Laboratoire de Biologie Physico-Chimique des Protéines Membranaires, Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris, France., Le Bon C; Université Paris Cité, CNRS, Laboratoire de Biologie Physico-Chimique des Protéines Membranaires, Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris, France., Moncoq K; Université Paris Cité, CNRS, Laboratoire de Biologie Physico-Chimique des Protéines Membranaires, Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris, France., Uzan M; Université Paris Cité, CNRS, Laboratoire de Biologie Physico-Chimique des Protéines Membranaires, Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris, France., Zito F; Université Paris Cité, CNRS, Laboratoire de Biologie Physico-Chimique des Protéines Membranaires, Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris, France., Miroux B; Université Paris Cité, CNRS, Laboratoire de Biologie Physico-Chimique des Protéines Membranaires, Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris, France. Bruno.Miroux@ibpc.fr.
Jazyk:	angličtina
Zdroj:	Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) [Methods Mol Biol] 2022; Vol. 2507, pp. 19-39.
DOI:	10.1007/978-1-0716-2368-8_2
Abstrakt:	Despite recent progresses in the use of eukaryotic expression system, production of membrane proteins for structural studies still relies on microbial expression systems. In this review, we provide protocols to achieve high level expression of membrane proteins in Escherichia coli, especially using the T7 RNA polymerase based expression system. From the design of the construct, the choice of the appropriate vector-host combination, the assessment of the bacterial fitness, to the selection of bacterial mutant adapted to the production of the target membrane protein, the chapter covers all necessary methods for a rapid optimization of a specific target membrane protein. In addition, we provide a protocol for membrane protein solubilization based on our recent analysis of the Protein Data Bank. (© 2022. The Author(s), under exclusive license to Springer Science+Business Media, LLC, part of Springer Nature.)
Databáze:	MEDLINE
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