Detection of cytomegalovirus in plasma of patient’s HIV by duplex real time PCR

Autor: Valdez-Salazar HA; Instituto Mexicano del Seguro Social, Centro Médico Nacional Siglo XXI, Hospital de Pediatría, Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Infecciosas y Parasitarias. Ciudad de México, México., Sánchez-Nájera N; Instituto Mexicano del Seguro Social, Centro Médico Nacional Siglo XXI, Hospital de Oncología, Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas. Ciudad de México, México., Ribas-Aparicio RM; Instituto Politécnico Nacional, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Posgrado en Biomedicina y Biotecnología Molecular. Ciudad de México, México., Pompa-Mera EN; Instituto Mexicano del Seguro Social, Centro Médico Nacional La Raza, Hospital de Infectología, Unidad de Investigación en Inmunología e Infectología. Ciudad de México, México., Mata-Marín JA; Instituto Mexicano del Seguro Social, Centro Médico Nacional La Raza, Hospital de Infectología, Unidad de Investigación en Inmunología e Infectología. Ciudad de México, México., Gómez-Delgado A; Instituto Mexicano del Seguro Social, Centro Médico Nacional Siglo XXI, Hospital de Pediatría, Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Infecciosas y Parasitarias. Ciudad de México, México., Aguilera P; Secretaría de Salud, Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía 'Manuel Velasco Suárez', Laboratorio de Patología Vascular, Cerebral. Ciudad de México, México., Ruiz-Tachiquín ME; Instituto Mexicano del Seguro Social, Centro Médico Nacional Siglo XXI, Hospital de Oncología, Unidad de Investigación Médica en Enfermedades Oncológicas. Ciudad de México, México.
Jazyk: Spanish; Castilian
Zdroj: Revista medica del Instituto Mexicano del Seguro Social [Rev Med Inst Mex Seguro Soc] 2020 Apr 13; Vol. 58 (2), pp. 154-160. Date of Electronic Publication: 2020 Apr 13.
DOI: 10.24875/RMIMSS.M20000013
Abstrakt: Background: Cytomegalovirus (CMV) is able to cause serious and even deadly diseases in immunocompromised patients. It is important to have a sensitive, specific and molecular viral tests for its detection, using as targets, key genes for viral replication. The following genes have been used in the molecular detection of CMV: UL122 (replication) and UL83 (most abundant protein of the tegument).
Objective: Detect and quantify CMV, by real-time duplex PCR, from a minimum amount of plasma.
Material and Methods: The UL122 and UL83 genes were amplified with different fluorophores, by real-time duplex PCR. To quantify CMV, curves were generated, starting with DNA-CMV (1.0-0.0000001 ng).
Results: The dynamic range of “master” duplex straight had a pendent (m) −3.0, the amplification efficiency was 115.44% plasmas from patients with HIV viral load ≥ 100,000 copies/mL, 11.36% were true positive for CMV and 88.64% had no amplifications or they were outside of the linear range of molecular detection.
Conclusions: This test identified two important CMV genes (UL122 and UL83) in a single reaction (FAM:VIC), viral detection was confirmed from a minimum amount of plasma. This mean a smaller amount of biological sample required and would add a tool to the clinical area, as well as a lower consumption of reagents and materials.
(Copyright: © 2020 Revista Medica del Instituto Mexicano del Seguro Social.)
Databáze: MEDLINE