A simple, ex vivo phagocytosis assay of Plasmodium vivax merozoites by flow cytometry.

Autor: Farias E; Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Imunologia Básica e Aplicada, Manaus, AM, Brasil.; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil., Bezerra F; Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Imunologia Básica e Aplicada, Manaus, AM, Brasil., Baia-da-Silva DC; Fundação de Medicina Tropical Dr Heitor Vieira Dourado, Manaus, AM, Brasil., Chaves YO; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil.; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Oswaldo Cruz, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia Parasitária, Rio de Janeiro, RJ, Brasil., Cardoza TB; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil., de Almeida MEM; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil.; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Oswaldo Cruz, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia Celular e Molecular, Rio de Janeiro, RJ, Brasil., Oliveira LB; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil., Lalwani P; Universidade Federal do Amazonas, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Imunologia Básica e Aplicada, Manaus, AM, Brasil.; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil., Orlandi PP; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil., Lacerda MVG; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil.; Fundação de Medicina Tropical Dr Heitor Vieira Dourado, Manaus, AM, Brasil., Lopes SCP; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil., Nogueira PA; Fundação Oswaldo Cruz-Fiocruz, Instituto Leônidas e Maria Deane, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Biologia da Interação Patógeno Hospedeiro, Manaus, AM, Brasil.
Jazyk: angličtina
Zdroj: Memorias do Instituto Oswaldo Cruz [Mem Inst Oswaldo Cruz] 2019 Oct 07; Vol. 114, pp. e190158. Date of Electronic Publication: 2019 Oct 07 (Print Publication: 2019).
DOI: 10.1590/0074-02760190158
Abstrakt: As phagocytosis is the first line of defense against malaria, we developed a phagocytosis assay with Plasmodium vivax (P. vivax) merozoites that can be applied to evaluate vaccine candidates. Briefly, after leukocyte removal with loosely packed cellulose powder in a syringe, P. vivax trophozoites matured to the merozoite-rich schizont stages in the presence of the E64 protease inhibitor. The Percoll gradient-enriched schizonts were chemically disrupted to release merozoites that were submitted to merozoite opsonin-dependent phagocytosis in two phagocytic lines with human and mouse antibodies against the N- and C-terminus of P. vivax Merozoite Surface Protein-1 (Nterm-PvMSP1 and MSP119). The resulting assay is simple and efficient for use as a routine phagocytic assay for the evaluation of merozoite stage vaccine candidates.
Databáze: MEDLINE