Recombinant human follicle stimulating hormone purification by a short peptide affinity chromatography.

Autor: Gurevich Messina JM; Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina.; CONICET-Universidad de Buenos Aires. Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Facultad de Farmacia y Bioquímica, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina., Giudicessi SL; Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina.; CONICET-Universidad de Buenos Aires. Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Facultad de Farmacia y Bioquímica, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina., Martínez Ceron MC; Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina.; CONICET-Universidad de Buenos Aires. Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Facultad de Farmacia y Bioquímica, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina., Urtasun N; Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina.; CONICET-Universidad de Buenos Aires. Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Facultad de Farmacia y Bioquímica, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina., Forno G; R&D Zelltek S.A., Universidad Nacional del Litoral, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Ciudad Universitaria, Paraje el Pozo, CC 242, Santa Fe, Argentina., Mauro L; R&D Zelltek S.A., Universidad Nacional del Litoral, Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas, Ciudad Universitaria, Paraje el Pozo, CC 242, Santa Fe, Argentina., Cascone O; Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina.; CONICET-Universidad de Buenos Aires. Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Facultad de Farmacia y Bioquímica, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina., Camperi SA; Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Cátedra de Biotecnología, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina.; CONICET-Universidad de Buenos Aires. Instituto de Nanobiotecnología (NANOBIOTEC), Facultad de Farmacia y Bioquímica, Junín 956, 1113, Buenos Aires, Argentina.
Jazyk: angličtina
Zdroj: Journal of peptide science : an official publication of the European Peptide Society [J Pept Sci] 2018 Nov; Vol. 24 (11), pp. e3128. Date of Electronic Publication: 2018 Oct 05.
DOI: 10.1002/psc.3128
Abstrakt: Peptide KVPLITVSKAK was selected to design a synthetic ligand for affinity chromatography purification of recombinant human follicle stimulating hormone (rhFSH), based on the interaction of the hormone with the exoloop 3 of its receptor. The peptide was acetylated to improve its stability to degradation by exopeptidases. A cysteine was incorporated at the C-termini to facilitate its immobilization to the chromatographic activated SulfoLink agarose resin. A sample of crude rhFSH was loaded to the affinity column, using 20 mM sodium phosphate, 0.5 mM methionine, and pH 5.6 and 7.2 as adsorption and elution buffers, respectively. The dynamic capacity of the matrix was 54.6 mg rhFSH/mL matrix and the purity 94%. The percentage of oxidized rhFSH was 3.4%, and that of the free subunits was 1.2%, both in the range established by the European Pharmacopeia, as also were the sialic acid content and the isoforms profile.
(© 2018 European Peptide Society and John Wiley & Sons, Ltd.)
Databáze: MEDLINE