| Autor: |
Almazán MC; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina.; Cátedra de Química Biológica, Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Nacional de Salta, Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Hoyos CL; Instituto de Patología Experimental, CONICET, Salta, Argentina.; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Krolewiecki AJ; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Cajal SP; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Copa GN; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina.; Cátedra de Química Biológica, Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Nacional de Salta, Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Fleitas PE; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina.; Cátedra de Química Biológica, Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Nacional de Salta, Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Barroso PA; Instituto de Patología Experimental, CONICET, Salta, Argentina.; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Marco JD; Instituto de Patología Experimental, CONICET, Salta, Argentina.; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Nasser JR; Cátedra de Química Biológica, Facultad de Ciencias Naturales, Universidad Nacional de Salta, Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina., Gil JF; Instituto de Investigaciones en Energía No Convencional, CONICET, Salta, Argentina.; Instituto de Investigaciones de Enfermedades Tropicales, Universidad Nacional de Salta, Orán, Argentina.; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Salta, Argentina. |
| Abstrakt: |
Cutaneous leishmaniasis is endemic in Salta province, which belongs to the northwest of Argentina. Leishmania spp. DNA from Giemsa-stained slides of up to 12 years in storage of patients from Salta was characterized through polymerase chain reaction (PCR) restriction fragment length polymorphism (RFLP). One hundred smears positive for microscopy, classified in a semiquantitative scale for amastigote density, were analyzed. Also, Leishmanin skin test (LST) results were included. DNA extraction was carried out applying lysis buffer with proteinase K, and then DNA was amplified with ribosomal internal transcribed spacer 1 primers. PCR products were digested with HaeIII enzyme. All PCR-positive smears (74/100) belonged to Viannia subgenus. A statistically significant, directly proportional relationship between semiquantitative microscopy and PCR results was detected. All patients had LST-positive results (induration ≥ 5 mm), and the smears of those with smaller induration (LST < 19 mm) gave a higher proportion of positive PCR results. This study determined that smear age did not affect PCR positivity, which allows retrospective analyzes and suggests smears might be useful for molecular complementary diagnosis. Because Leishmania ( Viannia ) braziliensis is the main circulating species in the study area, determining Viannia subgenus in all analyzed samples confirms previous findings. PCR positivity showed statistically significant differences according to semiquantitative microscopy, highlighting the importance of parasite burden in the diagnostic sensitivity of the method. Considering that smears of patients with smaller LST induration were more positive in PCR, a negative smear from patients with positive LST response, but < 19 mm, could actually represent a false-negative result. |
