Neutralizing Potential of Fab IgG Hybrid Antibody Against Dengue Virus (DENV-1,2,3,4) Expressed on Mesenchymal Stem Cells

Autor: RANTAM, Fedik A., ERNAWATI, Rahaju, RAHMAHANI, Jola, HENDRIANTO, Eryk, SUSILOWATI, Helen, A’LA, Rofiqul, MAYASARI, Rizki Kriestya
Jazyk: angličtina
Rok vydání: 2016
Předmět:
Zdroj: Volume: 44, Issue: 1 12-19
Acta Veterinaria Eurasia
ISSN: 2618-639X
2619-905X
Popis: Dengue is an acute mosquito born viralinfections in tropical and subtropical countries, that has been steadilyincreasing every year. Dengue haemorrhagic fever in Indonesia is caused by all4 viral serotypes termed as DENV-1, DENV-2, DENV-3, and DENV-4. It is verydifficult to treat the disease and there is no effective vaccine to eradicateDengue virus infections .The aim of this research is to express the antibodyfragment gene coding VL and VH of Fab IgG antibody in rat bone marrowmesenchymal stem cells (rat BM-MSCs). The genes were isolated from immunizedmice using inactive virus of all dengue serotypes. Then genes were hybridizedthrough ligation and insertion into plasmid pBR322, and transfected into rat BMMSCs.To analytically characterize Fab IgG hybrid binding ability, capacity andspecificity, we used immune precipitation, western blotting, neutralizationassay, and ELISA. All assays suggested that hybrid Fab IgG antibody have highreactivity and affinity, to efficiently neutralize all Dengue virus serotypes1,2,3,4. Results of this study show that hybrid Fab IgG antibody can be used asneutralizing agent for the treatment of dengue infections in the future.
Dengue humması, tropik ve subtropikalülkelerde sivrisineklerden kaynaklanan akut viral bir enfeksiyon olup, her yılgiderek artmaktadır. Endonezya’daki Dangkanamalı ateşine DENV-1, DENV-2, DENV-3 ve DENV-4 adı verilen 4 viral serotipneden olmaktadır. Hastalığın tedavisi çok zordur ve Dang virüsüenfeksiyonlarını yok etmek için etkili bir aşı yoktur. Bu araştırmanın amacı,sıçan kemik iliği mezenkimal kök hücrelerinde (sıçan BM-MSCs) bulunan Fab IgGantikorunun VL ve VH antikor fragmentini kodlayan geninin açığa çıkarılmasıdır.Genler, tüm dang serotiplerinin inaktif virüsü kullanılarak aşılanmışfarelerden izole edilmiştir. Sonrasında genler, ligasyon ve plasmid pBR322içine gömülmesi yoluyla hibridize edilmiş ve sıçan BMMSC’lerine nakledilmiştir. Analitik olarak Fab IgG’nin hibrid bağlama yeteneği, kapasitesi ve özgünlüğünü karakterizeetmek için; bağışıklık çökeltmesi, western blotting, nötralizasyon testi veELISA kullanılmıştır. Bütün deneyler, hibrid Fab IgG antikorunun tüm Dangvirüsü serotipleri 1,2,3,4’ü etkilibir şekilde nötrleştirmek için yüksek reaktiviteye ve afiniteye sahip olduğunuortaya koymaktadır. Bu çalışmanın sonuçları, melez Fab IgG antikorunungelecekte dang enfeksiyonlarının tedavisinde nötralize edici ajan olarakkullanılabileceğini göstermektedir.
Databáze: OpenAIRE
Externí odkaz: