Mechanism of the analgesic action of dipyrone : involvement of CB1 and CB2 cannabinoid receptors in the peripheral tissue

Autor: Dos Santos, Gilson Gonçalves, 1986
Přispěvatelé: Parada, Carlos Amílcar, 1960, Picolo, Gisele, Clemente-Napimoga, Juliana Trindade, Dias, Elayne Vieira, Teixeira, Juliana Maia, Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia, Programa de Pós-Graduação em Biologia Funcional e Molecular, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
Rok vydání: 2018
Předmět:
Zdroj: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
Popis: Orientador: Carlos Amilcar Parada Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Contexto e objetivo: A dipirona é um analgésico utilizado no controle da dor moderada. É rapidamente metabolizada em dois metabolitos bioativos: 4¿metil-aminoantipirina (4-MAA), por hidrólise, o qual é metabolizado em 4-aminoantipirina (4-AA), por reação enzimática. O objetivo deste estudo foi verificar a participação dos receptores canabinoides CB1 e CB2 e sua relação com os receptores TRPV1 e opióides do tecido periférico no efeito analgésico da dipirona, 4-MAA ou 4-AA. Métodos: PGE2 (100 ng), carragenina (100 µg) ou capsaicina (0.12 µg) foram administradas na pata de ratos Wistar. A hiperalgesia mecânica induzida por carragenina foi avalidada por von-Frey eletrônico e a nocicepção avaliada pela contagem de flinches. Para investigar o envolvimento dos receptores canabinóides CB1, CB2, opióides e TRPV1, seus antagonistas (respectivamente, AM251, AM630, naloxona e capsazepina) foram administrados 30 min antes da dipirona, 4-MAA e 4-AA. Espectrometria de massa foi utilizada para analisar a hidrolise da dipirona para 4-MAA. O efeito do 4-AA no receptor TRPV1 foi analisado por ensaio de Ca2+ em neurônios do gânglio da raiz dorsal (DRG) mantidos em cultura. Resultados: Os resultados demonstraram que a hiperalgesia induzida por carragenina foi reduzida de maneira dose-dependente pelo tratamento local com dipirona ou 4-MAA. Os dados também demonstraram que a dipirona foi localmente metabolizada em 4-MAA no tecido subcultâneo. Administração local de AM630, Naloxona ou norBNI, mas não de Naltrindole ou CTOP, reverteu totalmente o efeito anti-hiperalgésico da dipirona ou do 4-MAA. A administração local de 4-AA reduziu a nocicepção e o aumento de [Ca2+]i induzido por capsaicina em neurônios do DRG. O efeito anti-nociceptivo e a redução do [Ca2+]i promovidos por 4-AA foram revertidos por AM251. PGE2 aumentou a nocicepção induzida por capsaicina, a qual foi revertida por 4-AA. Em cultura de neurônios sensibilizados por PGE2 o metabolito 4-AA induziu aumento [Ca2+]i que foi revertido pela admininistração de capsazepina (antagonista de TRPV1). AM251 reduziu ambos, o [Ca2+]i induzido por 4-AA e por capsaicina. Conclusão: Os resultados demonstram que a dipirona é localmente metabolizada em 4-MAA. Os dados sugerem que este metabólito promove analgesia pela interação entre o sistema canabinóide e opióide em particular pela ativação dos receptores CB2 e Kappa opioide. Por sua vez, o metabólito 4-AA reduziu a atividade das fibras TRPV1+ por dessensibilizarem os receptores TRPV1 via ativação dos receptores canabinóides CB1 Abstract: Background and aim: Dipyrone is an analgesic used to control moderate pain. It is metabolized in two bioactive metabolites: 4-methylaminoantipyrine (4-MAA) by hydrolysis and 4-aminoantipyrine (4-AA) by enzymatic reaction. The aim of this study was to investigate the involvement of peripheral cannabinoid CB1 and CB2 receptors and their relation with TRPV1 and opioid receptors, respectively, in the anti-hyperalgesic effect of Dypirone, 4-MAA or 4-AA. Methods: PGE2 (100 ng), carrageenan (100 µg) or capsaicin (0.12) were administered in the hind paw of male Wistar rats. The carrageenan-induced mechanical hyperalgesia was evaluated by electronic von-Frey and capsaicin-induced nociception was evaluated by counting flinches. To analyze the involvement of cannabinoid CB1, CB2, TRPV1 and opioid receptors their antagonist (respectively AM251, AM630, naloxone and capsazepine) were administered 30 min before dipyrone, 4-MAA or 4-AA. Mass spectrometry was used to analyse dipyrone¿s hydrolysis to 4-MAA. The effect of 4-AA on TRPV1 was analyzed by Calcium-influx assay in Dorsal root ganglian (DRG) keept in culture. Results: The results showed that the hyperalgesia induced by the inflammatory agent carrageenan was reduced in a dose dependent-manner by 4-MAA or dipyrone. Dipyrone was locally metabolized to 4-MAA in the subcutaneous tissue of hind paw. Local administration of AM630, Naloxone or norBNI but not of naltrindole or CTOP reduced the analgesic effect of dipyrone or 4-MAA. The local administration of capsaicin induced nociception and [Ca2+]i that was reduced by 4-AA. 4-AA reduces nociception and the calcium influx was reduced by AM251. PGE2 increases the capsaicin-induced nociception that was reversed by 4-AA. 4-AA increased [Ca2+]i in neurons sensitized by PGE2 that was reduced by capsazepine, a TRPV1 antagonist. AM251 reduced the [Ca2+]i induced by 4-AA or capsaicin. Conclusion: These results demonstrated that dipyrone is locally hydrolyzed to 4-MAA. Also, these data suggested that this metabolite induced analgesic effect through an interaction of cannabinoid and opioid system. 4-AA reduced the activity of the TRPV1+ (fiber C) by desensitization of TRPV1 through cannabinoid CB1 receptor. These data also suggested that the efficacy analgesic of dipyrone is increased in inflammatory conditions Doutorado Fisiologia Doutor em Biologia Funcional e Molecular CAPES
Databáze: OpenAIRE
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