Aspectos histológicos do ovário de coelhas após criopreservação
| Autor: | Maria de Lourdes Pessole Biondo-Simões, Beatriz Angélica Charlotte Thomaz, Alvaro P. Ceschin, Vânia Cibele Minguetti-Camara, Carlos Gilberto Almodin, Sérgio Ossamu Ioshii |
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| Přispěvatelé: | PUCPR Instituto de Fertilidade, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Universidade Federal do Paraná Departamento de Cirurgia, Colégio Brasileiro de Cirurgiões, Materbaby Reprodução Humana e Genética, e Genética Universidade Estadual de Maringá, Faculdade de Medicina Evangélica do Paraná Instituto de Pesquisas Médicas, Universidade de Mie |
| Jazyk: | portugalština |
| Rok vydání: | 2005 |
| Předmět: |
Cryopreservation
Pathology medicine.medical_specialty Antigeno nuclear de células em proliferação Ovary H&E stain Obstetrics and Gynecology Ovário Biology Staining Coelhos medicine.anatomical_structure Fresh Tissue medicine Criopreservação Cryopreserved Tissue Immunohistochemistry Ploriferating cell nuclear antigem Rabbits Cytoplasmic Vacuolation Pyknosis Ovário/anatomia & histologia |
| Zdroj: | Revista Brasileira de Ginecologia e Obstetrícia v.27 n.11 2005 Revista brasileira de ginecologia e obstetrícia Federação Brasileira das Sociedades de Ginecologia e Obstetrícia (FEBRASGO) instacron:FEBRASGO Repositório Institucional da UNIFESP Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) instacron:UNIFESP |
| Popis: | OBJETIVO: avaliar a preservação folicular e as características celulares do tecido ovariano criopreservado, em coelhas. MÉTODOS: fez-se, sob anestesia, a ooforectomia direita de dez coelhas brancas, adultas. Dissecou-se o ovário mantendo-se o córtex com espessura de 1,5 milímetros. Fragmentou-se o tecido em pequenas secções, algumas para o estudo histológico de controle e outras destinadas à criopreservação pelo protocolo de congelamento lento. Passadas seis semanas efetuou-se o descongelamento e fez-se a avaliação histológica. As amostras do controle e do experimento, após processamento, foram coradas pela hematoxilina-eosina para identificação dos aspectos histológicos e submetidas à técnica imuno-histoquímica utilizando-se o PCNA (proliferating cell nuclear antigen) para a avaliação da viabilidade celular. Utilizaram-se os testes não paramétricos comparação entre duas proporções e Mann-Whitney e o teste paramétrico t de Student. RESULTADOS: observou-se que no tecido criopreservado só persistiram oócitos primordiais. Entre as alterações reversíveis identificaram-se: vacuolização citoplasmática em todas as amostras (p=0,039), lise estromal em 50% (p=0,648) e oócitos com contornos irregulares em 80% (p=0,007). Encontraram-se alterações irreversíveis como degeneração hialina e picnose em 30% das amostras (p=0,210). A análise imuno-histoquímica demonstrou os folículos, em diferentes estágios de desenvolvimento, no tecido não congelado e folículos primordiais no tecido criopreservado com positividade para o PCNA, indicando a presença de DNA ativo. CONCLUSÃO: no tecido ovariano criopreservado sobrevivem apenas os folículos primordiais; existem alterações histológicas reversíveis (vacuolização citoplasmática, lise estromal, fragmentação das células da granulosa e oócitos com contornos irregulares); alterações irreversíveis, em níveis não significantes (degeneração hialina e picnose) e presença de PCNA positivo em todos os folículos. PURPOSE: to evaluate follicular preservation and histologic characteristics of the cryopreserved ovarian tissue and to compare with the fresh one, in rabbits. METHODS: ten adult female white rabbits were submitted to right oophorectomy. The dried ovary was dissected and the cortex was maintained with approximately 1.5 millimeter thickness. The tissue was fractionated into small sections, some reserved for control histologic study and others destined for cryopreservation. Six weeks later the ovarian tissue was thawed and evaluated histologically. After histologic processing, the control and the experimental samples were stained with hematoxylin and eosin and treated immunohistochemically by the PCNA technique for evaluation of DNA preservation. Histologic alterations present in the fresh and in the cryopreserved tissues were identified, and cryopreserved tissue viability was evaluated. RESULTS: in the cryopreserved tissue only primordial follicles persisted. Reversible alterations were identified: cytoplasmatic vacuolation (p=0,039), stromal lysis (p=0.648) and oocytes with irregular contours (p=0.007). Irreversible alterations: (hyalin degeneration and pyknosis) were found, but not at significant levels (p=0.210). The immunohistochemical analysis showed PCNA staining of follicles at different stages of development in the fresh tissue and primordial follicles in the cryopreserved tissue, indicating the presence of active DNA in both tissues. CONCLUSION: in the cryopreserved ovarian tissue the following were observed: survival of only primordial follicles; significant reversible histologic alterations (cytoplasmic vacuolation, stromal lysis and oocytes with irregular contours); irreversible alterations (hyalin degeneration and pyknosis), and PCNA staining of all follicles. PUCPR Instituto de Fertilidade Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) EPM Universidade Federal do Paraná Departamento de Cirurgia Colégio Brasileiro de Cirurgiões Materbaby Reprodução Humana e Genética e Genética Universidade Estadual de Maringá Faculdade de Medicina Evangélica do Paraná Instituto de Pesquisas Médicas Universidade de Mie UNIFESP, EPM SciELO |
| Databáze: | OpenAIRE |
| Externí odkaz: |
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